Anti-EGFR-Kaninchen-Polyklonalantikörper [KD-validiert] für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P00533

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: EGFR-Funktion und -Lokalisierung

• Der epidermale Wachstumsfaktorrezeptor (EGFR), auch als Proto-Onkogen c-ErbB-1 und Rezeptor-Tyrosin-Protein-Kinase erbB-1 bezeichnet, wird durch das EGFR-Gen kodiert (alternative Namen: ERBB, ERBB1, HER1).
• Fungiert als Rezeptor-Tyrosinkinase, die an EGF-Familienliganden (EGF, TGFA, AREG, EPGN, BTC, EREG, HBEGF) bindet, um Rezeptordimerisierung und Autophosphorylierung zu induzieren und dadurch wichtige nachgeschaltete Signalwege zu aktivieren, einschließlich RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC, STATs und potenziell NF-κB (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960, PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029, PubMed:11116146). Verwandte Referenzen: PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029 PMID:11116146
• Phosphoryliert direkt nachgeschaltete Effektoren wie RGS16 (Erhöhung seiner GTPase-Aktivität und Verknüpfung mit GPCR-Signalgebung) und MUC1 (Förderung von SRC- und CTNNB1-Interaktionen) und reguliert die Zellmigration positiv über die Interaktion mit CCDC88A/GIV (PubMed:11602604, PubMed:11483589, PubMed:20462955). Verwandte Referenzen: PMID:11602604 PMID:11483589 PMID:20462955
• Eine alternative Spleiß-Isoform (Isoform 2) kann als Antagonist der EGF-vermittelten Signalgebung fungieren.
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die Zellmembran, das endoplasmatische Retikulum, den Golgi-Apparat, den Zellkern, Endosomen und sekretierte Formen, was seine dynamische Verteilung und Signalrollen widerspiegelt.
• Ubiquitär in humanen Geweben exprimiert, wobei Isoform 2 insbesondere in Eierstockkrebsen nachgewiesen wird.
• Klassifiziert als Proto-Onkogen, Tyrosin-Protein-Kinase und transmembranes Glykoprotein; dient auch als Wirtszellrezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus (HCV), was die Virusinternalisierung erleichtert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Glykosylierung, Hydroxylierung, Methylierung, Palmitoylierung und Ubiquitin-ähnliche Konjugation, wie durch UniProt-Schlüsselwörter angegeben.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 1021–1210) liegt innerhalb der intrazellulären C-terminalen Domäne; daher kann der Antikörper sowohl die Vollversion als auch C-terminale Fragmente detektieren. Spezifität in relevanten Zelllysaten oder Gewebeproben überprüfen.
• Für Western Blot wird eine Bande um 134 kDa erwartet; jedoch können Glykosylierung und Phosphorylierung zu Mobilitätsverschiebungen führen. Molekulargewichtsmarker einbeziehen und mit EGFR-positiven und -negativen Kontrollen validieren.
• Für IHC-P sollten Standard-Antigen-Retrieval- (z.B. Citratpuffer pH 6.0) und Blockierungsprotokolle optimiert werden; mit bekannten positiven (z.B. Haut, Plazenta) und negativen (z.B. Knockout) Geweben testen.
• Bei IF/ICC beeinflussen Fixierungsmethoden (PFA vs. Methanol) die EGFR-Membranfärbung; parallele Detektion mit einem Membranmarker wird empfohlen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; Assay-Bedingungen (Beschichtungskonzentration, Blockierung) erfordern individuelle Optimierung.
• Kreuzreaktivität wird für humane Proben berichtet; bei Verwendung in anderen Spezies die Reaktivität aufgrund potenzieller Sequenzvariationen unabhängig verifizieren.

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