Anti-EGFR monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P00533

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: EGFR-Funktion und Lokalisierung

• Der epidermale Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR) ist ein Rezeptor-Tyrosinkinase aus der ErbB-Familie, auch bekannt als ERBB1/HER1. Er bindet mehrere Liganden der EGF-Familie, einschließlich EGF, TGF-α und HB-EGF, was zu Rezeptordimerisierung und Autophosphorylierung an cytoplasmatischen Tyrosinresten führt.
  Verwandte Referenzen: PMID:10805725, PMID:2790960

• Bei Aktivierung löst EGFR mehrere wichtige intrazelluläre Signalwege aus: RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC und STAT-Module, wodurch Zellproliferation, Überleben, Migration und Differenzierung reguliert werden. Er aktiviert auch den NF-κB-Signalweg und kann andere Ziele wie RGS16 und MUC1 direkt phosphorylieren.
  Verwandte Referenzen: PMID:27153536, PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589

• Die subzelluläre Lokalisierung erfolgt hauptsächlich an der Zellmembran; EGFR kann jedoch auch im endoplasmatischen Retikulum, Golgi-Apparat, Endosomen und im Zellkern gefunden werden, und es existiert eine sekretierte Isoform.

• EGFR ist ein stark modifiziertes Glykoprotein mit einem berechneten Molekulargewicht von 134 kDa, das wichtige posttranslationale Modifikationen (PTMs) wie Phosphorylierung, Ubiquitinierung, Lipidierung und Disulfidbrücken aufweist.

• Der Rezeptor ist in humanen Geweben ubiquitär exprimiert, und eine alternativ gespleißte Isoform 2, die als Antagonist wirken kann, wird auch in Eierstockkrebs nachgewiesen.

• Zusätzlich zu seinen normalen physiologischen Rollen dient EGFR als Wirtszellrezeptor für den Eintritt des Hepatitis-C-Virus (HCV), vermittelt die Bildung des CD81-CLDN1-Komplexes und verstärkt die Virus-Zellmembranfusion.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne (Aminosäuren 335–525) des humanen EGFR; berücksichtigen Sie deren Konservierung über Spezies hinweg bei der Planung von Experimenten mit Maus- und Rattenproben.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 134 kDa; verwenden Sie einen geeigneten Gel-Prozentsatz und optimieren Sie die Transferbedingungen für große Proteine.
• Bei der Immunfluoreszenz an Paraffinschnitten (IF-P) kann eine Antigen-Demaskierung erforderlich sein; validieren Sie die Färbung in Positivkontrollgeweben wie Haut oder Lunge.
• Für ELISA testen Sie den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz, nachdem Sie die Kompatibilität mit Ihrem spezifischen Assay-Format bestätigt haben.

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