Anti-EGFR (L858R) Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P00533

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: EGFR-Funktion und Lokalisation

• EGFR ist ein Protoonkogenmitglied der ErbB-Familie der Rezeptor-Tyrosinkinasen, auch bekannt als HER1 oder ErbB-1.
• Bindet eine Vielzahl von EGF-ähnlichen Liganden (z. B. EGF, TGF-alpha, HB-EGF), was zur Rezeptordimerisierung, Autophosphorylierung und Aktivierung wichtiger Signalkaskaden führt, darunter RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC und STATs. Verwandte Referenzen: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Aktiviert die NF-kappa-B-Signalkaskade. Verwandte Referenzen: PMID:11116146
• Phosphoryliert RGS16 und MUC1 direkt und koppelt die EGFR-Signalübertragung jeweils an die G-Protein-Signalübertragung und die Beta-Catenin-Wege. Verwandte Referenzen: PMID:11602604, PMID:11483589
• Reguliert die Zellmigration über die Interaktion mit CCDC88A/GIV, das EGFR an der Zellmembran hält und die Signalübertragung fördert. Verwandte Referenzen: PMID:20462955
• Isoform 2 kann als Antagonist der EGF-Wirkung wirken.
• Lokalisiert sich überwiegend an der Zellmembran, kommt aber auch im Endoplasmatischen Retikulum, Golgi-Apparat, Kern, Endosomen und als sezemierte Form vor.
• Wird ubiquitär exprimiert; Isoform 2 wird auch in Eierstockkrebs nachgewiesen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Peptid innerhalb der Aminosäuren 800–900 von EGFR, das die L858R-Mutation enthält; bestätigen Sie die Spezifität für die Mutante durch Vergleich der Reaktivität gegenüber Wildtyp-EGFR.
• Verwenden Sie für Western Blot denaturierende und reduzierende Bedingungen; erwarten Sie eine Bande bei etwa 134 kDa. Validieren Sie mit Zelllysaten, die EGFR L858R exprimieren, und Wildtyp-Kontrollen.
• Optimieren Sie für IHC-P die Antigen-Retrieval und schließen Sie Gewebe ein, das bekanntermaßen die L858R-Mutation trägt (z. B. Lungenadenokarzinom) als Positivkontrolle.
• Erwägen Sie für ELISA die Verwendung des immunisierenden Peptids oder des rekombinanten EGFR L858R-Proteins als Standard und beurteilen Sie die potenzielle Kreuzreaktivität mit Wildtyp-EGFR.

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