Anti-EGF-Polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P01133

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: EGF-Funktion und -Lokalisation

• EGF wird als membrangebundenes Vorläuferprotein (Pro-epidermaler Wachstumsfaktor) synthetisiert, das proteolytisch gespalten wird, um reifes EGF freizusetzen. Dieses enthält mehrere EGF-ähnliche Domänen und fungiert als potenter Wachstumsfaktor.
• EGF stimuliert die Proliferation und Differenzierung von epidermalen und epithelialen Geweben sowohl in vivo als auch in vitro und fördert auch das Wachstum bestimmter Fibroblasten in Zellkultur.
• Wirkt als magnesiotropes Hormon in der Niere, verstärkt die Magnesiumrückresorption im distalen Konvolut durch EGFR-vermittelte Aktivierung des TRPM6-Magnesiumkanals.
• Kann in vitro das Auswachsen von Neuriten in Motoneuronen der Schlammschnecke Lymnaea stagnalis induzieren, was eine kreuzartige neurotrophe Aktivität demonstriert. Verwandte Referenzen: PMID:10964941
• Primär als Transmembranprotein an der Zellmembran lokalisiert, wobei seine extrazelluläre Domäne abgespalten wird, um lösliches, reifes EGF zu erzeugen.
• Exprimiert in Niere, Speicheldrüse, Großhirn und Prostata, wobei zusätzliche gewebespezifische Rollen durch seine Anwesenheit in diesen Organen nahegelegt werden.
• Enthält charakteristische EGF-ähnliche Domänenwiederholungen, Disulfidbindungen und Glykosylierungsstellen; wird in wichtigen biologischen Datenbanken unter Wachstumsfaktoren und Transmembranproteinen klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 851–950 von humanem EGF (Accession NP_001954.2) umfasst und sich in der C-terminalen Region des Proproteins befindet. Diese Region kann im membrangebundenen Vorläufer und einigen verarbeiteten Formen erhalten bleiben.
• Für Western Blotting (WB) sind Hauptbanden zu erwarten, die dem vollständigen Vorläufer (ca. 134 kDa) entsprechen, und möglicherweise niedermolekulare Spezies, die Spaltprodukte oder reifes EGF darstellen. Validieren Sie dies in EGF-exprimierenden Proben wie Nieren-, Speicheldrüsen- oder Prostatagewebe.
• Bei Immunfluoreszenz (IF-P) sollte die Färbung an der Plasmamembran lokalisiert sein, was mit dem membrangebundenen Vorläufer übereinstimmt. Permeabilisierungs- und Fixierungsbedingungen sollten für das spezifische Proben-System optimiert werden.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie diesen polyklonalen Antikörper mit validierten Capture- oder Detektionsreagenzien kombinieren. Testen Sie serielle Verdünnungen, um optimale Arbeitskonzentrationen für Ihr spezifisches Assay-Format zu ermitteln.
• Es wurde über Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-EGF berichtet; die Antikörperleistung in diesen Spezies sollte jedoch individuell unter Ihren experimentellen Bedingungen überprüft werden.

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