Anti-eEF2 Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB und ELISA - P13639

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von eEF2

• eEF2 (Elongationsfaktor 2) ist eine zentrale GTPase, die die ribosomale Translokation während der Elongation der Proteinsynthese antreibt. Verwandte Referenzen: PMID:26593721
• Es katalysiert die koordinierte Bewegung von tRNA-Molekülen und mRNA durch das Ribosom, wobei der Übergang vom vor-translokalisierten zum nach-translokalisierten Zustand erfolgt.
• eEF2 wird vom EEF2-Gen kodiert, Mutationen sind mit der spinozerebellären Ataxie 26 (SCA26), einer neurodegenerativen Erkrankung, verbunden.
• Das Protein ist überwiegend zytoplasmatisch lokalisiert, kann aber auch im Kern vorkommen, was auf mögliche extraribosomale Funktionen hindeutet.
• Posttranslationelle Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Acetylierung, ADP-Ribosylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität regulieren.
• Es ist ein Mitglied der GTP-bindenden Elongationsfaktor-Familie und ein wesentlicher Bestandteil der Proteinsynthese-Maschinerie.
• Sein Molekulargewicht beträgt etwa 95 kDa (vorhergesagt 95.338 Da aus der Sequenz).

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (AS 1–290) von humanem eEF2; berücksichtigen Sie diese Region bei der Epitopkartierung oder in Konkurrenzassays.
• Verwenden Sie für Western Blot Ganzzell- oder Gewebslysate; eEF2 ist reichlich vorhanden, sodass eine Standardbeladung (z. B. 20–30 µg) ausreichen kann. Optimieren Sie Blockierung und Antikörperverdünnung für Ihr System.
• Beschichten Sie im ELISA mit rekombinantem eEF2 oder Peptid und führen Sie eine Schachbrett-Titration durch, um optimale Beschichtungs- und Antikörperkonzentrationen zu ermitteln.
• Validieren Sie die Kreuzreaktivität mit menschlichen Proben; die Reaktivität mit anderen Spezies wurde nicht getestet, überprüfen Sie daher empirisch, wenn Sie nicht-menschliche Proben verwenden.
• Da eEF2 mehreren posttranslationellen Modifikationen unterliegt, können unter bestimmten Bedingungen Bandenverschiebungen oder mehrere Banden auftreten; Dephosphorylierung oder spezifische Inhibitoren können zur Identifizierung modifizierter Formen verwendet werden.

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