Anti-eEF2 (EF-2) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P13639

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: eEF2-Funktion und Lokalisierung

• Elongationsfaktor 2 (eEF2) katalysiert die GTP-abhängige ribosomale Translokation während der Translationselongation, bewegt das Peptidyl-tRNA vom A- zum P-Standort und deacyliertes tRNA vom P- zum E-Standort (PubMed:26593721) Verwandte Referenzen: PMID:26593721
• Diese Translokation ist mit mRNA-Bewegung und Konformationsänderungen im Ribosom gekoppelt, um den Übergang vom Prä- zum Post-Translokationszustand voranzutreiben (PubMed:26593721) Verwandte Referenzen: PMID:26593721
• eEF2 gehört zur TRAFAC-Klasse der Translationsfaktor-GTPase-Superfamilie und enthält GTP-Bindungs- und Hydrolasedomänen, die für seine Funktion essentiell sind
• Lokalisiert hauptsächlich im Zytoplasma, kann aber auch im Zellkern gefunden werden
• Unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung, ADP-Ribosylierung, Methylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität regulieren können
• Mutationen in EEF2 sind mit spinocerebellärer Ataxie 26 (SCA26), einer neurodegenerativen Erkrankung, assoziiert
• Das Protein hat ein berechnetes Molekulargewicht von ~95,3 kDa, was mit der beobachteten Wanderung bei ~95 kDa in der SDS-PAGE übereinstimmt

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–290) von humanem eEF2, was den Nachweis der Vollversion und einiger verkürzter Formen ermöglichen kann
• Für Western Blot ist die vorhergesagte Bande ~95 kDa; validieren Sie dies mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen
• Aufgrund der essentiellen Rolle von eEF2 in der Translation können die Expressionslevel mit den zellulären Wachstumsbedingungen variieren; ziehen Sie die Verwendung von Ladekontrollen wie β-Aktin oder GAPDH in Betracht
• ELISA kann für den quantitativen Nachweis verwendet werden; bestimmen Sie die optimale Antikörperverdünnung und den linearen Assay-Bereich empirisch
• Für Immunfluoreszenz oder IHC beachten Sie, dass eEF2 primär zytoplasmatisch ist, aber auch nukleäre Färbung zeigen kann; verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle

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