Anti-EED Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O75530

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: EED-Funktion und -Lokalisierung

• EED (Embryonic Ectoderm Development protein) ist auch als HEED, COGIS, WAIT-1 bekannt und ist ein Polycomb-Gruppen-Protein.
• Es ist eine Kernkomponente des PRC2/EED-EZH2-Komplexes, der Histon H3 an Lysin 9 und Lysin 27 methyliert, was zur transkriptionellen Repression der Zielgene führt.
• EED erkennt trimethyliertes Histon H1 an Lysin 26 (H1K26me3), was die Methyltransferase-Aktivität von PRC2 auf H3K27 hemmt, während die Erkennung von H3K27me3 die Ausbreitung dieses repressiven Marks fördert.
• Der PRC2-Komplex kann als Rekrutierungsplattform für DNA-Methyltransferasen dienen und verknüpft so Histonmethylierung und DNA-Methylierung für die epigenetische Stillelegung.
• Bekannte Zielgene, die durch PRC2 reprimiert werden, umfassen HOXC8, HOXA9, MYT1 und CDKN2A.
• EED lokalisiert im Zellkern und ist mit Chromosomen assoziiert; es enthält WD-Repeats und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung, Methylierung und Phosphorylierung.
• Es ist breit in Gewebem wie Gehirn, Dickdarm, Herz, Niere, Leber, Lunge, Muskel, Eierstock, Leukozyten, Bauchspeicheldrüse, Plazenta, Prostata, Milz, Dünndarm, Hoden, Thymus und Uterus exprimiert.
• EED scheint in Brust- und Dickdarmkrebs überexprimiert zu sein, was auf eine Rolle bei der Tumorentstehung hindeutet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-100) von humanem EED. Da alternative Initiierungs- und Spleiß-Isoformen existieren, sollte überprüft werden, ob die Ziel-Isoform in Ihrem experimentellen System vorhanden ist.
• Für den Western Blot wird eine Bande um 50 kDa vorhergesagt; validieren Sie dies mit geeigneten positiven Kontrollen (z. B. Kernextrakte aus HeLa- oder HEK293-Zellen).
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC ist eine Kern- und Chromosomenfärbung zu erwarten. Die Permeabilisierungs- und Fixierungsbedingungen müssen möglicherweise optimiert werden.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Mensch, Maus und Ratte; eine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies sollte bei Bedarf getestet werden.
• Für ELISA verwenden Sie das Immunogen-Peptid als positive Kontrolle, um die Bindungsspezifität zu bewerten.

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