Anti-EEA1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q15075

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: EEA1-Funktion und -Lokalisierung

• EEA1 (Early Endosome Antigen 1), auch als endosomen-assoziiertes Protein p162 oder ZFYVE2 bezeichnet, ist ein ~162 kDa Protein, das beim Menschen durch das EEA1-Gen kodiert wird.
• Es fungiert als Tethering-Faktor durch Bindung an Phosphatidylinositol-3-phosphat (PtdIns(3)P) auf endosomalen Membranen und erleichtert das Andocken und die Fusion von Vesikeln während des frühen endosomalen Transports.
• Das Protein lokalisiert sich vorwiegend zur zytoplasmatischen Seite der Membranen früher Endosomen und ist auch im Zytosol vorhanden, was seiner Rolle in der Membrandynamik entspricht.
• EEA1 enthält einen N-terminalen C2H2-Zinkfinger, ausgedehnte Coiled-Coil-Domänen und eine C-terminale FYVE-Zinkfingerdomäne, die direkt die PtdIns(3)P-Bindung vermittelt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, und das Protein ist der Identifizierung durch Proteomik unterzogen, was auf eine breite Expression über Gewebe hinweg hinweist.
• Schlüsselwörter: 3D-Struktur, Coiled Coil, Zytoplasma, Direkte Proteinsequenzierung, Endosom, Membran, Metallbindung, Phosphoprotein, Proteomics-Identifizierung, Referenzproteom, Zink, Zinkfinger.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1182–1411 von humanem EEA1 und deckt den C-terminalen Bereich ab, der die FYVE-Domäne enthält. Dies kann zur spezifischen Erkennung des全长-Proteins beitragen.
• Für den Western Blot wird eine Hauptbande in der Nähe von 162 kDa erwartet. Verwenden Sie SDS-PAGE-Gele mit niedrigem Prozentsatz und verlängerte Transferzeiten, um die Detektion dieses hochmolekularen Ziels zu verbessern.
• In IHC-P-Experimenten sollten die Antigen-Retrieval-Bedingungen für jeden Gewebetyp optimiert werden, und geeignete positive und negative Kontrollen werden empfohlen.
• Für ELISA-Anwendungen sollte in Betracht gezogen werden, den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz nach Validierung mit rekombinantem EEA1 oder Zelllysaten zu verwenden.

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