Anti-EDEM2-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q9BV94

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von EDEM2

• EDEM2 (C20orf31, C20orf49, bA4204.1) ist ein alpha-Mannosidase-ähnliches Protein 2 zur Verstärkung des ER-Abbaus.
• Es spielt eine zentrale Rolle im ER-assoziierten Abbauweg (ERAD), indem es fehlgefaltete Glykoproteine auf N-Glykan-abhängige Weise erkennt und für den proteasomalen Abbau markiert. Zugehörige Referenzen: PMID:15537790 PMID:25092655
• Es wird angenommen, dass EDEM2 den ERAD-Prozess einleitet, indem es den ersten Mannose-Trimming-Schritt der Substratglykane katalysiert und Man9GlcNAc2 in Man8GlcNAc2 umwandelt. Zugehörige Referenzen: PMID:25092655
• Es bindet wahrscheinlich an exponierte hydrophobe Bereiche fehlgefalteter Proteine und erleichtert dadurch deren Rücktranslokation und Abbau.
• Das Protein befindet sich im Lumen des endoplasmatischen Retikulums.
• EDEM2 wird in menschlichen Geweben ubiquitär exprimiert, wobei die stärkste Expression im Dünndarm und in peripheren Blutleukozyten und die niedrigste Expression im Gehirn und in der Skelettmuskulatur festgestellt wird.
• Es unterliegt alternativem Spleißen und ist an der Reaktion auf ungefaltete Proteine beteiligt.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht des humanen EDEM2 beträgt ungefähr 65 kDa.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Fragment hergestellt, das die Aminosäuren 399–578 des humanen EDEM2 umfasst. Diese Region kann die Zielspezifität bestimmen; eine Überprüfung mit eigenen Kontrollen sollte in Betracht gezogen werden.
• Für den Western Blot wird eine Bande bei etwa 65 kDa erwartet. Die Verwendung von Zelllinien wie HeLa oder HEK293 als Positivkontrollen ist empfehlenswert, eine Validierung in Ihrem spezifischen Probensystem wird jedoch ebenfalls empfohlen.
• Bei der Immunzytochemie (IF/ICC) sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für Proteine im ER-Lumen optimiert werden. Erste Tests mit bekannten EDEM2-exprimierenden Zellen können bei der Etablierung des Protokolls hilfreich sein.
• ELISA-Anwendungen können unter Verwendung von rekombinantem EDEM2-Protein oder zellbasierten Assays entwickelt werden. Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.
• Der Antikörper zeigt eine Kreuzreaktivität mit murinem EDEM2 und eignet sich daher für Untersuchungen an Mausmodellen. Die Reaktivität sollte jedoch stets mit geeigneten Lysaten von Mausgewebe bestätigt werden.
• Als polyklonaler Antikörper kann eine Variabilität zwischen verschiedenen Chargen auftreten. Führen Sie in jedem Experiment Positiv- und Negativkontrollen mit.

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