Anti-E2F4 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q16254

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: E2F4-Funktion und Lokalisierung

• E2F4 ist ein Mitglied der E2F-Familie von Transkriptionsfaktoren und spielt eine entscheidende Rolle bei der Zellzyklusregulation und Transkriptionskontrolle.
• Es bindet DNA kooperativ mit DP-Proteinen an E2-Erkennungsstellen (5'-TTTC[CG]CGC-3'), die in Promotoren von Zellzyklus- und DNA-Replikationsgenen vorkommen.
• Fungiert als Transkriptionsaktivator, treibt den Übergang von der G1- zur S-Phase an und koordiniert die Expression von Genen, die für die DNA-Synthese benötigt werden.
• Bindet mit hoher Affinität an Pocket-Proteine RBL1 und RBL2 und kann unter bestimmten Bedingungen auch mit RB1 interagieren.
• Spezifisch erforderlich für die Differenzierung mehrzilierter Zellen: Zusammen mit MCIDAS und E2F5 aktiviert es Gene, die für die Zentriolen-Biogenese essentiell sind.
• Lokalisiert im Zellkern, was mit seiner Rolle in der Transkriptionsregulation übereinstimmt.
• Weit verbreitet in humanen Geweben exprimiert, einschließlich Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere und Bauchspeicheldrüse.
• Unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität und Interaktionen modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen für diesen Antikörper ist ein synthetisches Peptid entsprechend den Aminosäuren 250–350 von humanem E2F4. Für Western Blot ist ein Band bei etwa 44 kDa zu erwarten. Validieren Sie die Spezifität in Ihrem Proben-System mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.
• Für ELISA sollten Sie direkte Antigenbeschichtung oder Capture-Formate in Betracht ziehen. Titrieren Sie den Antikörper und validieren Sie ihn mit rekombinantem Protein oder Zelllysaten.
• Da E2F4 phosphoryliert wird, beachten Sie, dass posttranslationale Modifikationen die Antikörpererkennung beeinflussen können. Überprüfen Sie die Reaktivität unter Ihren experimentellen Bedingungen.
• Der Antikörper zeigt Kreuzreaktivität mit humanen und murinen Proben; stellen Sie die Spezieskompatibilität bei der Experimentplanung sicher.
• Für Zellzyklusstudien synchronisieren Sie Zellen, um die E2F4-Expression während des G1/S-Übergangs anzureichern.

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