Anti-E-Selectin/CD62E Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q00690

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von E-Selectin/CD62E

• E-Selectin (CD62E, ELAM-1, LECAM2) ist ein Zelloberflächen-Glykoprotein, das beim Menschen durch das Sele-Gen kodiert wird. Es gehört zur Selektin-Familie der Adhäsionsmoleküle und fungiert hauptsächlich bei der Immunüberwachung und Entzündung.
• Kernfunktion: Vermittelt die initiale Adhäsion und das „Rolling“ von Blutneutrophilen auf zytokinaktivierten Endothelzellen durch Interaktion mit seinem Liganden PSGL-1 (SELPLG). Verwandte Referenzen: PMID:1375914
• Könnte auch zur Kapillarmorphogenese beitragen, was auf eine Rolle bei der Angiogenese und der Neubildung von Blutgefäßen hindeutet.
• Überwiegend in der Zellmembran als Typ-I-Transmembranprotein lokalisiert; seine extrazelluläre Region kann nach Aktivierung abgespalten werden.
• Strukturdomänen umfassen eine N-terminale C-Typ-Lektin-Domäne, eine EGF-ähnliche Domäne, mehrere Sushi-(SCR/CCP)-Wiederholungen, eine einzelne Transmembranhelix und einen kurzen zytoplasmatischen Schwanz. Die Kalziumbindung an die Lektin-Domäne ist für die Ligandenerkennung unerlässlich.
• Enthält mehrere Disulfidbrücken, die die extrazellulären Domänen stabilisieren, und ist stark glykosyliert.
• Bildet zusammen mit L-Selectin und P-Selectin die Selektin-Familie, wobei jedes unterschiedliche, aber überlappende Expressionsmuster und Ligandenspezifitäten aufweist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser polyklonale Kaninchenantikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein erhoben, das die extrazelluläre Domäne (aa 22-557) von Maus E-Selectin abdeckt; es wird erwartet, dass er sowohl die vollständige membrangebundene Form als auch die lösliche, abgespaltene Ektodomäne erkennt.
• Für den Western Blot sollte ein Band bei ca. 66 kDa (vorhergesagtes Molekulargewicht ~66,7 kDa) beobachtet werden; beachten Sie, dass Glykosylierung zu leichten Wanderungsverschiebungen führen kann. Eine Titration sowohl des primären als auch des sekundären Antikörpers wird empfohlen.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zum Capture oder Nachweis von rekombinantem oder endogenem E-Selectin verwendet werden. Validieren Sie mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen in Ihrem Assay-System.
• Das Produkt ist auf Reaktivität mit Mausproben validiert; die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht bestimmt.
• Da das Immunogen den Großteil der extrazellulären Region abdeckt, kann es zum Nachweis von denaturiertem Protein unter reduzierenden Bedingungen geeignet sein; jedoch können native konformationsabhängige Anwendungen eine empirische Optimierung erfordern.
• Erwägen Sie die Verwendung einer 5%igen Magermilch- oder BSA-Blockierungslösung, um unspezifische Bindungen zu reduzieren, insbesondere beim Western Blot von Gewebelysaten.

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