Anti-Dynein-Zwischenkette 1 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – Q9UI46

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Dynein-Zwischenkette 1

• Das DNAI1-Gen kodiert für Dynein-Axonemal-Zwischenkette 1, ein WD-Wiederholungen enthaltendes Protein, das als kritische strukturelle und funktionelle Komponente des äußeren Dynein-Arm-Komplexes in beweglichen Zilien und Flagellen dient.
• Dieses Protein ist essenziell für die ziliäre Bewegung entlang von Mikrotubuli und erzeugt die Kraft, die für die mukoziliäre Clearance in den Atemwegen und für die Spermienbeweglichkeit erforderlich ist.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Protein-Isoformen, was zur gewebespezifischen Regulation der Dynein-Assemblierung und -funktion in verschiedenen zilierten Zelltypen beitragen kann.
• Auf Proteinebene wird DNAI1 überwiegend in respiratorischen zilierten Epithelzellen exprimiert, was mit seiner Rolle beim Schutz der Atemwege vor der Anreicherung von Pathogenen und Partikeln übereinstimmt.
• Subzellulär lokalisiert DNAI1 entlang des gesamten Axonems von Zilien und Flagellen, verankert an den äußeren Doubletten-Mikrotubuli als Teil des Dynein-Motorkomplexes.
• Mutationen in DNAI1 sind mit primärer ziliärer Dyskinesie (PCD) und dem Kartagener-Syndrom verbunden – Erkrankungen, die durch chronische Atemwegsinfektionen, Situs inversus und männliche Unfruchtbarkeit aufgrund unbeweglicher Zilien und Spermien gekennzeichnet sind.
• Posttranslationale Modifikationen, insbesondere Phosphorylierung, regulieren die Dynein-Aktivität und axonemale Dynamik, obwohl die genauen Modifikationsstellen an DNAI1 noch nicht vollständig kartiert sind.
• Die N-terminale Region enthält WD40-Wiederholungsdomänen, die Protein-Protein-Interaktionen vermitteln, die für die Integrität des Dynein-Komplexes und die Erzeugung von Motorkraft essenziell sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Für den Western Blot-Nachweis bereiten Sie Lysate aus zilierten Epithelzelllinien oder Geweben zur Bestätigung der endogenen Expression vor; eine Bande um 79 kDa ist zu erwarten.
• Verwenden Sie Standard-SDS-PAGE-Bedingungen (z. B. 8–10 % Gel) und optimieren Sie den Transfer für hochmolekulare Proteine, um eine effiziente Detektion zu gewährleisten.
• Da das Immunogen die N-terminalen Aminosäuren 1–200 umfasst, kann der Antikörper mehrere Isoformen erkennen; validieren Sie die Spezifität bei Vorhandensein von Knockdown- oder Knockout-Kontrollen.
• Für ELISA-Anwendungen beschichten Sie die Platte mit dem rekombinanten Immunogen oder gereinigten Protein und titrieren Sie den Antikörper, um eine passende Arbeitskonzentration zu ermitteln.
• Da eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte nachgewiesen wurde, kann dieser Antikörper für Studien an diesen Arten verwendet werden; dennoch wird eine entsprechende artspezifische Protokolloptimierung empfohlen.

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