Anti-DROSHA Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9NRR4

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DROSHA-Funktion und -Lokalisierung

• DROSHA (Ribonuklease 3) ist ein nukleäres Protein, auch bekannt als RNASEN, RN3 oder RNase III, kodiert durch das DROSHA-Gen. Es gehört zur Familie der Ribonukleasen III, doppelstrang-spezifischer Endoribonukleasen.
• Als katalytische Untereinheit des Mikroprozessor-Komplexes verarbeitet DROSHA primäre miRNA-Transkripte (pri-miRNAs) im Zellkern zu ~70-Nukleotid-Vorläufer-miRNAs (pre-miRNAs) und initiiert so den kanonischen miRNA-Biogenese-Weg.
• Es spaltet sowohl den 3'- als auch den 5'-Strang der Stamm-Schleifen-Struktur in pri-miRNAs in einem definierten Abstand von der Verzweigungsstelle und setzt Haarnadel-pre-miRNAs frei, die im Zytoplasma durch DICER weiterverarbeitet werden.
• Über die miRNA-Reifung hinaus ist DROSHA an der Vor-Ribosomen-RNA-Verarbeitung beteiligt und spielt eine Rolle bei der Bildung von GW/P-Körpern, was es mit dem RNA-Stoffwechsel und der Gen-Stilllegung verbindet.
• Subzellulär lokalisiert DROSHA überwiegend im Zellkern, angereichert im Nukleolus, kann aber unter bestimmten Bedingungen auch im Zytoplasma nachgewiesen werden.
• Das Protein ist ubiquitär exprimiert und unterliegt alternativem Spleißen und posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, die seine Aktivität regulieren können.
• Mit DROSHA assoziierte Schlüsselwörter sind: Endonuklease, Hydrolase, RNA-bindend, Magnesium/Mangan-Metallbindung und RNA-vermittelte Gen-Stilllegung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der N-terminalen Region (aa 1-100). Bei Anwendungen wie Western Blot wandert das Voll-Längen-Protein bei ~159 kDa; sorgen Sie für einen ausreichenden Transfer und verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker.
• Für Immunfluoreszenz/ICC sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, da das Zielprotein überwiegend nukleär ist; erwägen Sie die Verwendung einer Kern-Gegenfärbung zur Bestätigung der Lokalisierung.
• Die ELISA-Leistung kann mit rekombinantem DROSHA-Protein oder synthetischem Peptid überprüft werden; eine Titration des Antikörpers wird empfohlen.
• Überprüfen Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen, von Menschen stammenden Proben-System, da die Expressionsniveaus variieren können.

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