Anti-DR5/TRAILR2/TNFRSF10B Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - O14763

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DR5/TRAILR2/TNFRSF10B Funktion und Lokalisierung

• DR5/TRAILR2/TNFRSF10B ist ein Mitglied der Tumornekrosefaktor-Rezeptor-Superfamilie, auch bekannt als Death Receptor 5 (DR5), KILLER und TRAIL-R2. Es wird durch das TNFRSF10B-Gen auf Chromosom 8p21.3 kodiert.
• Der Rezeptor bindet an den zytotoxischen Liganden TNFSF10/TRAIL und löst Apoptose durch die Rekrutierung des Adapterproteins FADD und Caspase-8 zur Bildung des Death-Inducing Signaling Complex (DISC) aus. Verwandte Referenzen: PMID:10549288
• Nach der DISC-Bildung wird Caspase-8 proteolytisch aktiviert und initiiert eine Kaskade von Caspasen, die die Apoptose ausführen. Die DR5-vermittelte Signalübertragung aktiviert auch NF-kB, was sie mit Überlebenswegen verbindet.
• DR5 ist für die ER-Stress-induzierte Apoptose essentiell, was seine Rolle in zellulären Stressantworten unterstreicht.
• Das Protein ist ein Typ-I-Transmembranglykoprotein, das in der Plasmamembran lokalisiert ist. Es enthält charakteristische extrazelluläre cysteinreiche Domänen und eine zytoplasmatische Death-Domäne.
• DR5 wird in adulten und fetalen Geweben weit verbreitet exprimiert, mit besonders hoher Expression in Tumorzelllinien (z.B. HeLa, K-562, HL-60, SW480, A-549, G-361) sowie in Herz, Leber, Bauchspeicheldrüse, Milz, Thymus, Prostata, Eierstock, Gebärmutter, Plazenta und Darmtrakt; im Gehirn ist es nicht nachweisbar.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Glykosylierung und Disulfidbindungsbildung, die für die Rezeptorstabilität und Ligandenbindung entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das für diesen polyklonalen Antikörper verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 260-440 des humanen DR5/TRAILR2/TNFRSF10B, was die intrazelluläre Death-Domäne und einen Teil der zytoplasmatischen Region umfasst. Dieses Design könnte für den Nachweis sowohl der vollständigen als auch der gespaltenen Rezeptorformen geeignet sein.
• Angesichts der Spezifität für humanes DR5 sollten Experimentatoren die Kreuzreaktivität bei Verwendung nicht-humaner Proben validieren; die Reaktivität für humanes Material wurde bestätigt.
• Für den Western Blot (WB) können Zelllinien mit hoher DR5-Expression (z.B. HeLa, K-562, SW480) als positive Kontrollen dienen, während Hirngewebe negativ sein kann. Ziehen Sie geeignete Lyse- und Reduktionsbedingungen in Betracht, um das ~48 kDa-Band zu beobachten.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise eine Optimierung der Beschichtungsbedingungen und des Nachweissystems aufgrund der Membranlokalisierung des Rezeptors; rekombinantes DR5-Protein oder Zelllysate können als Capture-Ziele untersucht werden.
• Da DR5 alternatives Spleißen und Glykosylierung durchläuft, können in einigen Proben mehrere Banden oder ein Verschmieren beobachtet werden. Die Verwendung von Deglykosylierungsenzymen oder die Bestätigung durch siRNA-Knockdown kann helfen, die Bandenidentität zu validieren.

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