Anti-DR4-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für FC, ELISA - O00220

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von DR4

• Rezeptoridentität: TNFRSF10A (Todesrezeptor 4, TRAIL-R1) ist ein Mitglied der Tumornekrosefaktor-Rezeptor-Superfamilie und zeichnet sich durch eine extrazelluläre Domäne mit zysteinreichen Wiederholungen aus.
• Induktion der Apoptose: DR4 dient als Rezeptor für den zytotoxischen Liganden TNFSF10/TRAIL. Nach der Ligandenbindung rekrutiert das Adaptermolekül FADD Caspase-8 zur Bildung des Todes-induzierenden Signalkomplexes (DISC), was zur proteolytischen Aktivierung von Caspase-8 und zur Einleitung der apoptotischen Kaskade führt (PubMed:19090789, PubMed:26457518, PubMed:38532423). Zugehörige Referenzen: PMID:19090789, PMID:26457518, PMID:38532423
• Aktivierung von NF-kappa-B: Zusätzlich zur Apoptose fördert DR4 die Aktivierung des NF-kappa-B-Signalwegs und trägt dadurch zu Entzündungs- und Überlebensreaktionen bei (PubMed:9430227). Zugehörige Referenzen: PMID:9430227
• Subzelluläre Lokalisation: Der Rezeptor ist hauptsächlich in der Zellmembran und in Membranrafts lokalisiert, kann jedoch auch im Zytoplasma/Zytosol nachgewiesen werden.
• Gewebeexpression: DR4 wird weit verbreitet exprimiert, mit besonders hohen Konzentrationen in der Milz, peripheren Blutleukozyten, dem Dünndarm, dem Thymus und bestimmten Krebszelllinien (K-562, MCF-7) sowie in aktivierten T-Zellen.
• Posttranslationale Modifikationen und strukturelle Merkmale: Das Protein enthält ein Signalpeptid und Disulfidbindungen und unterliegt, wie durch Proteomikstudien gezeigt, einer Glykosylierung, Phosphorylierung und Methylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 124–232 innerhalb der extrazellulären Domäne des humanen DR4; daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich Epitope in der Ligandenbindungsregion und weist möglicherweise eine bevorzugte Erkennung der nativen Konformation auf.
• Bei der Durchflusszytometrie (FC) wird erwartet, dass die Färbung lebender, nicht permeabilisierter Zellen DR4 auf der Zelloberfläche markiert, während für den intrazellulären Nachweis möglicherweise eine Permeabilisierung erforderlich ist.
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper zum Nachweis von rekombinantem oder nativem DR4 verwendet werden; Sandwich-Immunoassays können von der Kombination mit einem zweiten Antikörper profitieren, der gegen ein nicht überlappendes Epitop gerichtet ist.
• Als monoklonaler Kaninchenantikörper gewährleistet er eine gleichbleibende Qualität zwischen verschiedenen Chargen; die optimalen Arbeitskonzentrationen sollten für jedes Assaysystem empirisch bestimmt werden.
• Eine Kreuzreaktivität wurde ausschließlich für humanes DR4 berichtet; die Leistung mit DR4 anderer Spezies wurde nicht charakterisiert.

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