Anti-DPPA3/Stella polyklonaler Antikörper für WB und ELISA – Q8QZY3

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Stella

• DPPA3, auch bekannt als Stella, PGC7 oder „developmental pluripotency-associated protein 3“, ist ein für primordiale Keimzellen (PGCs) spezifisches Protein, das für die frühe embryonale Entwicklung entscheidend ist.
• Es spielt eine zentrale Rolle bei der epigenetischen Reprogrammierung während der Befruchtung: Es schützt insbesondere den maternalen Pronukleus und bestimmte paternale geprägte Loci vor der TET3-vermittelten Oxidation von 5mC zu 5hmC und bewahrt dadurch die DNA-Methylierungsmuster.
• Stella erkennt und bindet an Lysin 9 dimethyliertes Histon H3 (H3K9me2) im maternalen Genom; diese Markierung ist im maternalen Pronukleus häufig, im paternalen Pronukleus, der größtenteils mit Protaminen gepackt ist, jedoch nicht.
• Das Protein ist außerdem an der Chromatinkondensation während der Oocytogenese beteiligt und könnte zur Aufrechterhaltung totipotenter/pluripotenter Zustände während der Präimplantationsentwicklung beitragen.
• Auf subzellulärer Ebene ist DPPA3 sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma lokalisiert, was mit seinen Funktionen bei der Chromatininteraktion und bei zytoplasmatischen Prozessen übereinstimmt.
• Die Gewebeexpression ist auf Keimzellen und frühe Embryonen beschränkt: Sie wurde in unreifen Oozyten, heranreifenden Oozyten, Präimplantationsembryonen, Blastozysten, Epiblasten und primordialen Keimzellen nachgewiesen; in differenzierten somatischen Zellen und adulten Hoden geht die Expression verloren.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 1–150 von humanem Stella umfasst, sodass der Antikörper wahrscheinlich Epitope innerhalb dieser N-terminalen Region erkennt. Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf konservierte Sequenzen hin; validieren Sie die Spezifität in der für Sie relevanten Art.
• Beim Western Blot sollte in Proben aus Mausoozyten, frühen Embryonen oder Keimzelllinien eine erwartete Bande bei etwa 18 kDa nachgewiesen werden. Aufgrund der eingeschränkten Expression wird eine sorgfältige Beachtung der Probenvorbereitung und der Ladekontrollen empfohlen.
• Bei ELISA kann der Antikörper zur Detektion oder als Fänger in Assays eingesetzt werden, die eine Erkennung von Stella erfordern. Die optimalen Arbeitskonzentrationen sollten für jede Anwendung experimentell bestimmt werden.
• Wie bei jedem polyklonalen Antikörper kann es zu Chargen-zu-Chargen-Variationen kommen; die Einbeziehung geeigneter Positiv- und Negativkontrollen (z. B. Stella-Knockout-Gewebe) kann die Zuverlässigkeit der Ergebnisse erhöhen.

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