Polyklonaler Anti-Dopamin-Transporter/SLC6A3-Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q01959

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Dopamin-Transporters/SLC6A3

• Der natriumabhängige Dopamin-Transporter (DAT), der vom SLC6A3-(DAT1)-Gen kodiert wird, ist für die Beendigung der dopaminergen Neurotransmission verantwortlich, indem er die natrium- und chloridabhängige Wiederaufnahme von Dopamin aus dem synaptischen Spalt vermittelt (PubMed:10375632, PubMed:11093780, PubMed:1406597). Zugehörige Referenzen: PMID:10375632 PMID:11093780 PMID:1406597
• Zusätzlich zu Dopamin transportiert DAT auch Noradrenalin mit ähnlichen ionischen Abhängigkeiten und trägt dadurch zur Regulation der Katecholamin-Signalübertragung bei (nach Ähnlichkeit).
• DAT ist überwiegend in der Zellmembran von Neuronen lokalisiert und insbesondere in neuronalen Fortsätzen, Axonen und axonalen Varikositäten dopaminerger Nervenendigungen angereichert.
• Die Expression ist in der Substantia nigra (PubMed:7637582) und im Striatum (PubMed:17296554) am höchsten, wichtigen Hirnregionen für die motorische Kontrolle und die Verarbeitung von Belohnungsreizen; die Proteinexpression wurde in axonalen Varikositäten bestätigt (PubMed:17296554). Zugehörige Referenzen: PMID:7637582 PMID:17296554
• Das Protein gehört zur Familie der Neurotransmittertransporter des Solute-Carrier-6-(SLC6)-Systems und enthält zwölf Transmembranhelices, die die Substrat- und Ionenbindungsstellen bilden.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören N-Glykosylierung und Disulfidbrücken, die für die Faltung des Transporters und seine Ausrichtung zur Plasmamembran entscheidend sind.
• Genetische Variationen in SLC6A3 stehen mit neurologischen Erkrankungen, einschließlich Parkinsonismus und Dystonie, in Verbindung, wie durch krankheitsbezogene Schlüsselwörter hervorgehoben wird.
• Neben dem Dopamintransport wurde DAT in Tiermodellen mit der lichtabhängigen Rückbildung hyaloider Netzhautgefäße in Verbindung gebracht, was auf mögliche nicht-neuronale Funktionen hindeutet (nach Ähnlichkeit).

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der intrazellulären N-terminalen Domäne (AS 1-100); für Immunfluoreszenz (IF) und Immunhistochemie (IHC) wird eine Permeabilisierung empfohlen, um den Zugang des Antikörpers zu gewährleisten.
• Beim Western Blot (WB) wird eine Bande bei ungefähr 68 kDa erwartet; geeignete positive und negative Kontrollen sollten einbezogen werden, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei IHC–Paraffin-(IHC-P)- und IF–Paraffin-(IF-P)-Anwendungen kann eine Antigenrückgewinnung mittels hitzevermitteltem Citratpuffer die Detektion verbessern; testen Sie den Antikörper mit Gehirngewebeschnitten, von denen bekannt ist, dass sie DAT exprimieren.
• Für ELISA kann der polyklonale Antikörper entweder als Fang- oder als Detektionsreagenz verwendet werden; optimieren Sie die Beschichtungskonzentrationen und Blockierungsbedingungen für das beste Signal-Rausch-Verhältnis.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde festgestellt; bei der Interpretation der Ergebnisse sollte jedoch die Sequenzübereinstimmung zwischen den Arten in der Immunogenregion berücksichtigt werden.

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