Anti-DOG-1/TMEM16A Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q5XXA6

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DOG-1/TMEM16A Funktion und Lokalisierung

• ANO1 kodiert für Anoctamin-1, einen kalziumaktivierten Chloridkanal (CaCC), der eine zentrale Rolle beim transepithelialen Anionentransport und der Kontraktion glatter Muskulatur spielt. Verwandte Referenzen: PMID:20056604, PMID:22178883, PMID:22946059
• Der Kanal ist unerlässlich für die Schrittmacheraktivität der interstitiellen Cajal-Zellen (ICCs) im Gastrointestinaltrakt und steuert so die Darmmotilität.
• In Atemwegsepithelzellen trägt ANO1 wesentlich zur basalen und stimulierten Chloridleitfähigkeit bei und ist entscheidend für die Entwicklung des Trachealknorpels.
• Es erleichtert die CFTR-Aktivierung und -Membranexpression durch Verstärkung der Ca²⁺-Freisetzung aus dem endoplasmatischen Retikulum, was seine Rolle beim chloridbezogenen Transport bei Mukoviszidose unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:28963502
• ANO1 reguliert die durch die Interleukine IL3 und IL8 induzierte Expression von Atemwegsschleim über das asthma-assoziierte Protein CLCA1 und hochreguliert MUC5AC; widersprüchliche Hinweise deuten jedoch darauf hin, dass die MUC5AC-Expression in bestimmten Kontexten möglicherweise nicht ANO1 benötigt. Verwandte Referenzen: PMID:33026825, PMID:31732694
• Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen mit unterschiedlicher Kalziumempfindlichkeit und Chloridpermeabilität, einschließlich einer Variante für Schweißdrüsenepithel mit erhöhter basaler Cl⁻-Permeabilität und einer hypersensitiven Isoform.
• Das Protein lokalisiert hauptsächlich an der apikalen Plasmamembran und in präsynaptischen Kompartimenten, mit breiter Gewebeexpression einschließlich Leber, Skelettmuskel, gastrointestinaler glatter Muskulatur, Nierensammelrohren, Nasenepithel und ekkrinen Schweißdrüsen.
• Posttranslationale Modifikationen wie Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Phosphorylierung sind entscheidend für den Transport und die funktionelle Regulation von Anoctamin-1.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot ist unter reduzierenden und denaturierenden Bedingungen eine Bande bei etwa 114 kDa zu erwarten; validieren Sie dies mit positiven Kontrolllysaten aus humanen oder murinen Geweben, von denen bekannt ist, dass sie ANO1 exprimieren, wie gastrointestinale glatte Muskulatur oder Atemwegsepithel.
• Das Immunogen (aa 40–210) entspricht der N-terminalen Region; der Nachweis bestimmter Spleiß-Isoformen kann variieren, überprüfen Sie daher bei Bedarf die isoform-spezifische Erkennung.
• Führen Sie bei der Durchführung von ELISA eine Titration des Antikörpers durch, um optimale Arbeitskonzentrationen zu bestimmen, und bestätigen Sie die Spezifität gegen rekombinantes ANO1-Protein oder Überexpressionszelllysate.
• Als polyklonaler Antikörper sind Chargen-zu-Chargen-Schwankungen möglich; schließen Sie geeignete Kontrollen ein und ziehen Sie bei unspezifischen Banden eine Kreuzabsorption in Betracht.
• Die Kreuzreaktivität ist für Mensch und Maus verifiziert; für andere Spezies führen Sie ein Sequenzalignment der Immunogenregion und Pilotversuche durch.

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