Anti-DNMT3L Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q9UJW3

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DNMT3L-Funktion und Lokalisierung

• DNMT3L ist ein katalytisch inaktiver Regulatorfaktor von DNA-Methyltransferasen, der je nach Kontext die DNA-Methylierung fördern oder hemmen kann.
• Essentiell für die Funktion von DNMT3A und DNMT3B: aktiviert DNMT3A und DNMT3B durch Bindung an deren katalytische Domäne (PubMed:17687327). Verwandte Referenzen: PMID:17687327
• Es beschleunigt die Bindung von DNA und S-Adenosyl-L-Methionin (AdoMet) an die Methyltransferasen und dissoziiert nach DNA-Bindung vom Komplex (PubMed:17687327). Verwandte Referenzen: PMID:17687327
• DNMT3L erkennt unmethyliertes Histon H3 Lysin 4 (H3K4me0) und induziert de novo DNA-Methylierung durch Rekrutierung oder Aktivierung von DNMT3 (PubMed:17687327). Verwandte Referenzen: PMID:17687327
• In Keimzellen wird DNMT3L zusammen mit DNMT3A für die Methylierung von geprägten Loci benötigt, und in männlichen Keimzellen methyliert es spezifisch Retrotransposons, um deren Mobilisierung zu verhindern.
• In embryonalen Stammzellen fördert DNMT3L sowohl die DNA-Methylierung von Haushaltsgenen als auch hemmt die Methylierung an bivalenten Genpromotoren durch Interaktion mit der EZH2-Komponente des PRC2/EED-EZH2-Komplexes, wodurch die Rekrutierung von DNMT3A/B verhindert wird.
• DNMT3L fördert die Differenzierung von ES-Zellen zu primordialen Keimzellen, indem es die DNA-Methylierung am RHOX5-Promotor hemmt und so dessen Expression aktiviert.
• Subzellulär lokalisiert DNMT3L überwiegend im Zellkern, was mit seiner Rolle bei der Chromatinmodifikation übereinstimmt.
• Es wird in mehreren Geweben, einschließlich Hoden, Eierstöcken und Thymus, in geringen Mengen exprimiert und gehört zur Familie der Zinkfinger-Proteine mit Metallbindungsmotiven.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Erwägen Sie die Durchführung einer Kernfraktionierung, um DNMT3L für den Western-Blot-Nachweis anzureichern, da es im Zellkern lokalisiert ist.
• Für IHC-P kann eine Antigen-Demaskierung erforderlich sein; validieren Sie in Geweben mit bekannter geringer Expression wie Hoden oder Eierstöcken.
• Die Immunogen-Sequenz ist bei Mensch, Maus und Ratte konserviert; Kreuzreaktivität wird vorhergesagt, sollte aber experimentell bestätigt werden.
• Der Antikörper detektiert ein Band bei etwa 44 kDa; ein vorab gefärbter Protein-Leiter wird für eine genaue Größenbestimmung empfohlen.
• Peptidblockierung mit dem Immunogen kann als Spezifitätskontrolle für sowohl WB- als auch IHC-P-Assays dienen.

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