Polyklonaler Anti-DNMT3L-Antikörper für WB, ELISA - Q9UJW3

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von DNMT3L

• DNMT3L ist ein katalytisch inaktives, DNA-Methyltransferase-ähnliches Protein, das die de novo-DNA-Methylierung durch Interaktion mit DNMT3A und DNMT3B reguliert (PubMed:17687327).
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:17687327
• Es erkennt unmethyliertes Histon-H3-Lysin 4 (H3K4me0) und erleichtert die Aktivität der DNA-Methyltransferase, indem es die Bindung von DNA und S-Adenosyl-L-Methionin beschleunigt (PubMed:17687327).
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:17687327
• Es ist für die Differenzierung embryonaler Stammzellen und die Entwicklung von Keimzellen unerlässlich und wird für die Methylierung geprägter Loci sowie die Stilllegung von Retrotransposons benötigt.
• Es ist ausschließlich im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der epigenetischen Regulation übereinstimmt.
• Es zeigt eine gewebespezifische Expression in Hoden, Eierstock und Thymus, mit niedrigen Konzentrationen in anderen Geweben.
• Es enthält eine Zinkfinger-Domäne und unterliegt alternativem Spleißen; in Proteomikstudien wurde es als Kernprotein identifiziert.
• Es erfüllt eine bimodale Funktion: Es fördert die DNA-Methylierung an Haushaltsgenen, hemmt jedoch die Methylierung an Promotoren bivalenter Gene durch Interaktion mit dem PRC2/EED-EZH2-Komplex.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Für Western Blot sollten Kernextrakte aus Zellen verwendet werden, von denen bekannt ist, dass sie DNMT3L exprimieren, beispielsweise aus Hoden- oder embryonalen Stammzellen. Der Antikörper erkennt eine Bande bei etwa 44 kDa; das Molekulargewicht sollte anhand geeigneter Marker überprüft werden.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, können einige unspezifische Banden auftreten. Die Verdünnung sollte titriert und geeignete Kontrollen sollten eingeschlossen werden.
• Beim ELISA entspricht das Immunogen einem großen Teil des Proteins, wodurch ein empfindlicher Nachweis von rekombinantem oder nativem DNMT3L ermöglicht wird. Die Beschichtungs- und Nachweisbedingungen sollten optimiert werden.
• Die Reaktivität in humanen und murinen Proben sollte bestätigt werden. Bei Bedarf sollte die Leistungsfähigkeit in anderen Spezies überprüft werden.

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