Anti-DNMT1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P26358

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: DNMT1-Funktion und -Lokalisierung

• DNMT1, auch bekannt als DNA-Methyltransferase HsaI, MCMT oder CXXC9, ist ein ~183 kDa Kernprotein, das als die primäre erhaltende DNA-Methyltransferase beim Menschen dient.
• Es methyliert bevorzugt halbmethylierte CpG-Dinukleotide und assoziiert während der S-Phase mit DNA-Replikationsfoci, um Methylierungsmuster getreu auf den neu synthetisierten Strang zu kopieren und so die epigenetische Vererbung sicherzustellen. Verwandte Referenzen: PMID:17200670, PMID:21745816, PMID:26070743
• Während der G2- und M-Phasen bleibt DNMT1 chromatinspezifisch assoziiert, um die Methylierung unabhängig von der Replikation aufrechtzuerhalten und so genomische Methylierungsmarker über den Zellzyklus hinweg zu bewahren. Verwandte Referenzen: PMID:21745816
• DNMT1 vermittelt auch die transkriptionelle Repression durch direkte Bindung an HDAC2 und kann die DNA-Methylierung mit Histonomodifikationen, wie der H3K9-Dimethylierung, in Zusammenarbeit mit DNMT3B und CTCFL koordinieren. Verwandte Referenzen: PMID:10888872, PMID:18413740
• Es bildet einen Corepressor-Komplex, der KRAS-getriebene Hypermethylierung und Stummschaltung von Tumorsuppressorgenen beim kolorektalen Karzinom erleichtert, und unterhält ähnlich die Repression von Entwicklungsgenen in embryonalen Stammzellen. Verwandte Referenzen: PMID:24623306
• Es ist ubiquitär exprimiert mit den höchsten Spiegeln in fetalen Geweben, Herz, Niere und Plazenta; Isoform 2 ist weniger abundant. Lokalisiert im Kern und an Chromosomen und enthält charakteristische CXXC-Zinkfingerdomänen (Schlüsselwörter: alternatives Spleißen, Zinkfinger).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein N-terminales Fragment (aa 1-124) von DNMT1 hergestellt; daher wird erwartet, dass er die全长-DNMT1 und möglicherweise N-terminale Trunktionsprodukte erkennt.
• Führen Sie beim Western Blot ein 6-8%iges SDS-PAGE-Gel durch und sorgen Sie für einen effizienten Transfer aufgrund der großen Größe von DNMT1 (~183 kDa).
• Für die Immunhistochemie und Immunfluoreszenz kann eine Kernpermeabilisierung erforderlich sein; erwägen Sie die Validierung der Färbespezifität mit DNMT1-Knockdown- oder -Knockout-Kontrollen.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-DNMT1, aber Benutzer sollten die Leistung in jeder Spezies und jedem Gewebetyp überprüfen, angesichts der ubiquitären, aber variablen Expression.
• Als polyklonaler Antikörper kann er Chargen-zu-Chargen-Schwankungen aufweisen; fügen Sie eine Ladungskontrolle und interne Referenzstandards für quantitative Assays hinzu.

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