Anti-DNM1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q05193

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DNM1-Funktion und Lokalisierung

• Dynamin-1 (DNM1) ist eine große GTPase mit einem Molekulargewicht von ~97 kDa (UniProt: 97.408 Da), die eine zentrale Rolle bei der Membranspaltung während der Endozytose spielt.
• Katalysiert die Hydrolyse von GTP, um die Vesikelabtrennung zu vermitteln, und ist an mehreren endozytotischen Wegen beteiligt, einschließlich clathrin-vermittelter Endozytose und synaptischer Vesikelendozytose (PubMed:15703209, PubMed:20428113, PubMed:29668686). Verwandte Referenzen: PMID:15703209 PMID:20428113 PMID:29668686
• Lagert sich selbst zu Ringen und helicalen Polymeren um Vesikelhälse herum an, wodurch die Membran verengt wird; die GTP-Hydrolyse löst dann Konformationsänderungen aus, die die Membranspaltung fördern (PubMed:30069048, PubMed:7877694, PubMed:9922133, PubMed:19084269). Verwandte Referenzen: PMID:30069048 PMID:7877694 PMID:9922133 PMID:19084269
• Reguliert frühe Stadien der Clathrin-vermittelten Endozytose in nicht-neuronalen Zellen über Dephosphorylierung stromabwärts der EGFR-Signalgebung und interagiert mit DNAJC6 während der Bildung von Clathrin-beschichteten Vesikeln (CCV) (PubMed:29668686, PubMed:12791276). Verwandte Referenzen: PMID:29668686 PMID:12791276
• Vermittelt schnelle Endozytose (RE), einen Ca²⁺-abhängigen, Clathrin- und K⁺-unabhängigen Prozess in Chromaffinzellen; assoziiert auch mit Mikrotubuli und erzeugt Kraft (By similarity).
• Subzellulär lokalisiert an der Zellmembran, Clathrin-beschichteten Gruben, zytoplasmatischen Vesikeln, Präsynapse und Chromaffingranula.
• Unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Methylierung und Nitrierung; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen. Schlüsselwörter heben auch die Beteiligung an Krankheitsvarianten und Epilepsie hervor.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 400–490 von humanem DNM1, eine zentrale Region, abdeckt. Überprüfen Sie die Sequenzhomologie, wenn der Antikörper für andere Spezies verwendet werden soll.
• Für Western Blotting wandert DNM1 unter denaturierenden Bedingungen bei etwa 97 kDa; schließen Sie geeignete Molekulargewichtsmarker ein und validieren Sie mit positiven Kontrolllysaten aus menschlichem, Maus- oder Rattengehirn oder neuronalen Zelllinien.
• Für ELISA sollten Sie das rekombinante Immunogen oder vollständige DNM1 als Beschichtungsantigen verwenden; führen Sie eine Schachbretttitration durch, um die Arbeitskonzentrationen von Capture- und Nachweisreagenzien zu optimieren.
• Für Mensch, Maus und Ratte wird Kreuzreaktivität berichtet; individuelle experimentelle Systeme erfordern jedoch möglicherweise eine Optimierung der Blockierungs- und Antikörperverdünnungsbedingungen.

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