Anti-DNASE1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P24855

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DNASE1-Funktion und Lokalisierung

• DNASE1 (Desoxyribonuklease I) ist eine sekretierte Serum-Endonuklease, die von einer Vielzahl exokriner und endokriner Organe produziert wird. Sie spaltet bevorzugt proteinfreie DNA und steht im Zusammenhang mit Apoptose (PubMed:11241278, 2251263, 2277032).
  Verwandte Referenzen: PMID:11241278 PMID:2251263 PMID:2277032

• Sie bindet spezifisch an G-Aktin und blockiert die Aktin-Polymerisation (By similarity).

• Zusammen mit DNASE1L3 spielt sie eine Schlüsselrolle beim Abbau von neutrophilen extrazellulären Fallen (NETs), DNA-basierten Strukturen, die von Neutrophilen freigesetzt werden, um Krankheitserreger einzufangen (By similarity). Dieser Abbau hilft, NET-induzierte Gefäßverschlüsse und Organschäden während einer Entzündung zu verhindern (By similarity).

• Das Protein ist eine kalziumabhängige Endonuklease; es ist N-glykosyliert und enthält Disulfidbindungen (aus UniProt-Keywords). Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst den sekretorischen Weg, Zymogengranula und die Kernhülle.

• DNASE1 wird am stärksten in Geweben des Verdauungssystems exprimiert, mit reichlich vorhandenen Mengen in Urin, Samen und Speichel (aus TISSUE SPECIFICITY).

• Als pharmazeutisches Ziel ist es mit systemischem Lupus erythematodes (SLE) assoziiert und wird therapeutisch zur DNA-Beseitigung bei Mukoviszidose eingesetzt (aus Keywords).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das den Aminosäuren 30–235 des humanen DNASE1 entspricht und einen großen Teil des sekretierten reifen Proteins abdeckt. Diese breite Epitop-Abdeckung erhöht die Wahrscheinlichkeit, native und denaturierte Formen zu erkennen.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande nahe 31 kDa zu erwarten; Arbeitsverdünnungen sollten vom Endanwender optimiert werden.
• Für Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sollte die Verwendung von Permeabilisierungsmitteln in Betracht gezogen werden, da DNASE1 primär sekretiert wird und für den Nachweis eine Permeabilisierung der Zellmembran erforderlich sein kann.
• Es wurde eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte beobachtet; daher könnte dieser Antikörper für Studien mit Nagetiermodellen geeignet sein. Eine Validierung im spezifischen Proben-System wird jedoch empfohlen.
• Für ELISA-Anwendungen kann es erforderlich sein, verschiedene Antikörperkonzentrationen und Beschichtungsbedingungen zu testen; es wird kein festes Protokoll bereitgestellt.
• Dieser polyklonale Antikörper, hergestellt im Kaninchen, kann von Charge zu Charge variieren; immer geeignete Kontrollen mitführen.

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