Anti-DNA-Topoisomerase I (TOP1) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA - P11387

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der DNA-Topoisomerase I

• DNA-Topoisomerase I (TOP1) ist ein Enzym, das vom TOP1-Gen kodiert wird, mit einem Molekulargewicht von etwa 91 kDa (UniProt: P11387). Es ist auch als DNA-Topoisomerase I bekannt.
• TOP1 lindert DNA-Supercoiling und Torsionsspannung während der Replikation und Transkription, indem es vorübergehend einen Strang der DNA spaltet, ein kovalentes Zwischenprodukt bildet, den freien Strang rotiert und dann den Bruch wieder verknüpft.
• Es reguliert alternatives Spleißen von Tissue Factor (F3) prä-mRNA in Endothelzellen, was auf eine Rolle bei der gerinnungsbezogenen Genexpression hinweist.
• TOP1 trägt zur Regulation des zirkadianen Rhythmus bei, indem es die Chromatinstruktur an ROR-Antwort-Elementen auf dem BMAL1-Promotor moduliert und so die Transkription von Kern-Uhrgenen beeinflusst.
• Das Protein lokalisiert im Zellkern, mit Vorkommen sowohl im Nukleolus als auch im Nukleoplasma.
• TOP1 wird unter anderem in Endothelzellen exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, und es wurde als Proto-Onkogen in chromosomalen Umlagerungen impliziert.
• Es ist ein Phosphoprotein und unterliegt Ubiquitinierung und Isopeptidbindungsbildung, was eine komplexe regulatorische Kontrolle widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der N-terminalen Region (aa 1-100), daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich das Voll-Längen-Protein. Für Western Blot ist eine Bande nahe 91 kDa zu erwarten; ziehen Sie die Verwendung geeigneter Ladekontrollen und die Optimierung von Blockierbedingungen in Betracht.
• Für IHC-P können Antigen-Retrieval-Methoden notwendig sein, um das Epitop freizulegen; validieren Sie die Färbung in bekannten positiven Geweben wie solchen mit hohem Endothelzellanteil.
• Überprüfen Sie bei der Immunpräzipitation die Aufnahmeeffizienz in relevanten Zelllysaten, die TOP1 exprimieren, und verwenden Sie geeignete Negativkontrollen (z.B. IgG).
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; kombinieren Sie ihn bei Bedarf mit einem passenden Antikörper und validieren Sie die Empfindlichkeit mit rekombinanten Proteinstandards.

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