Anti-DNA-Polymerase beta Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P06746

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der DNA-Polymerase beta

• Die DNA-Polymerase beta (POLB), auch bekannt als 5'-Desoxyribosephosphat-Lyase (5'-dRP-Lyase) oder AP-Lyase, ist eine Reparatur-Polymerase, die eine Schlüsselrolle bei der Basenexzisionsreparatur (BER) spielt. Dieser Weg korrigiert geschädigte Basen, und POLB ist für den Reparatur-Synthese-Schritt essenziell. Verwandte Referenzen: PMID:10556592, PMID:9207062, PMID:9572863
• Nach Basenexzision und Strangbruch durch eine AP-Endonuklease entfernt POLB die 5'-Desoxyribosephosphat-Gruppe von der vorinzisierten AP-Stelle über seine 5'-dRP-Lyase-Aktivität. Anschließend füllt sie die Einzelnukleotid-Lücke über ihre DNA-Polymerase-Aktivität auf. Verwandte Referenzen: PMID:10556592, PMID:17526740, PMID:8841119
• POLB weist außerdem eine AP-Lyase-Aktivität auf, die Zucker-Phosphat-Bindungen 3' zu einer intakten abasischen (AP-)Stelle spaltet und dadurch zu alternativen Reparaturwegen beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:9614142
• Die Polymeraseaktivität von POLB ist distributiv statt prozessiv und fügt schrittweise ein Nukleotid nach dem anderen hinzu – dies unterscheidet sie von replikativen DNA-Polymerasen.
• POLB lokalisiert sowohl im Kern als auch im Zytoplasma, was mit seiner Rolle bei der nuklearen DNA-Reparatur und möglichen zytoplasmatischen Funktionen übereinstimmt.
• Posttranslationelle Modifikationen von POLB umfassen Acetylierung, Methylierung und Ubiquitin-Konjugation, die seine Stabilität, Aktivität oder Interaktion mit anderen BER-Proteinen regulieren können.
• POLB ist eine Schlüsselkomponente der zellulären Antwort auf DNA-Schäden, trägt zur Genomstabilität bei und spielt eine Rolle bei Prozessen wie der DNA-Replikation und -Reparatur.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst das vollständige menschliche POLB-Protein (Aminosäuren 1–335), was die Bildung von Antikörpern gegen mehrere Epitope begünstigen kann. Berücksichtigen Sie diese breite Reaktivität bei der Interpretation von Ergebnissen.
• Für den Western Blot ist eine spezifische Bande um 38 kDa zu erwarten. Validieren Sie mit geeigneten Positiv- und Negativkontrollen und erwägen Sie die Verwendung von KO-validierten Lysaten zur Bestätigung der Spezifität.
• Dieser Antikörper ist geeignet für IHC-P, IF/ICC und ELISA. Optimieren Sie Verdünnungen und Antigen-Retrieval-Bedingungen experimentell für jede Anwendung und Probenart.
• Es wurde eine Kreuzreaktivität mit murinem POLB nachgewiesen, was Studien in Mausmodellen ermöglicht. Überprüfen Sie jedoch die Kreuzreaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen System.
• Als polyklonaler Antikörper sollte die Charge-zu-Charge-Konsistenz überwacht werden. Fügen Sie interne Referenzstandards für quantitative Vergleiche zwischen Experimenten hinzu.

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