Anti-DNA-PKcs Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P78527

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von DNA-PKcs (DNA-abhängige Proteinkinase, katalytische Untereinheit)

• DNA-PKcs ist die katalytische Untereinheit des DNA-abhängigen Proteinkinase-Komplexes (DNA-PK), kodiert durch das PRKDC-Gen (auch bekannt als HYRC, HYRC1, DNPK1, p460).
• Als molekularer Sensor für DNA-Schäden ist DNA-PKcs für die nicht-homologe Endverbindung (NHEJ) unerlässlich, den Hauptweg zur Reparatur von Doppelstrangbrüchen (DSBs) und der V(D)J-Rekombination. Verwandte Referenzen: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• DNA-PKcs erfordert DNA-Bindung zur katalytischen Aktivierung; es wird durch das Ku70/Ku80-Heterodimer (XRCC6/XRCC5) an DNA-Enden rekrutiert, um gebrochene DNA-Ende zu schützen und auszurichten und den Bruch für die NHEJ bereitzustellen. Verwandte Referenzen: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• Neben der DNA-Reparatur wirkt DNA-PKcs als Gerüstprotein, moduliert die Transkription, fördert die Ribosomenassembly durch Verarbeitung der prä-rRNA und erhält die telomere Stabilität. Verwandte Referenzen: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805, PMID:32103174
• DNA-PKcs ist hauptsächlich im Zellkern und im Nukleolus lokalisiert, mit zusätzlichem Vorkommen im Zytosol.
• Als Serin/Threonin-Kinase, die das [ST]-Q-Konsensus erkennt, phosphoryliert DNA-PKcs wichtige Substrate einschließlich H2AX (Ser-139) für die DNA-Schadenssignalisierung, AKT (Ser-473) für die Regulation des PI3K/AKT-Weges und zahlreiche DNA-Reparaturfaktoren (z. B. XRCC4, XRCC5, XRCC6). Verwandte Referenzen: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805, PMID:14627815, PMID:16046194, PMID:15262962

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 3987-4086 des humanen DNA-PKcs umfasst; erwarten Sie Reaktivität in der Nähe des C-terminalen Bereichs des Proteins.
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 469 kDa; erwägen Sie die Verwendung von SDS-PAGE-Gradientengelen mit niedrigem Prozentsatz und verlängerte Transferzeiten, um ein effizientes Blotting dieses großen Proteins zu gewährleisten.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und der Immunfluoreszenz (IF/ICC) wird eine Validierung der Antigen-Retrieval-Methoden und Fixierungsbedingungen in relevanten Gewebe- oder Zellproben empfohlen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargen-Konsistenz vom Lieferanten bestätigt werden; fügen Sie in Ihrem experimentellen System immer geeignete positive und negative Kontrollen hinzu.

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