Anti-DNA-Ligase IV Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P49917

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DNA-Ligase IV-Funktion und Lokalisierung

• DNA-Ligase 4 (LIG4), auch bekannt als DNA-Ligase IV, ist eine ATP-abhängige DNA-Ligase, die für die nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) zur Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen (DSBs) und die V(D)J-Rekombination essentiell ist. Sie verschließt gebrochene DNA-Enden nach dem Auffüllen von Lücken. (PMID:12517771, PMID:17290226, PMID:9242410) Verwandte Referenzen: PMID:12517771 PMID:17290226 PMID:9242410
• LIG4 bildet einen Komplex mit XRCC4, der seine Ligationsaktivität stimuliert und die Reparatur verschiedener DNA-Endkonfigurationen ermöglicht, einschließlich Nicks, kompatibler Überhänge und Lücken mit Mikrohomologie. (PMID:17290226, PMID:9242410, PMID:9809069) Verwandte Referenzen: PMID:17290226 PMID:9242410 PMID:9809069
• Die Ligation durch den LIG4-XRCC4-Komplex ist für die Bindung an DNA-Enden vom DNA-PK-Komplex abhängig und koordiniert die NHEJ-Reparatur. (PMID:10854421) Verwandte Referenzen: PMID:10854421
• LIG4 ist ausschließlich im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der Genomerhaltung übereinstimmt.
• Die Gewebeexpression von LIG4 ist in Hoden, Thymus, Prostata und Herz am höchsten, entsprechend Geweben mit aktiven Rekombinations- und Reparaturprozessen.
• Das Protein gehört zur DNA-Ligase-Familie und enthält konservierte Domänen für ATP-Bindung und Metallkoordination (Magnesium), die für seine katalytische Funktion entscheidend sind.
• Mutationen in LIG4 sind mit Krankheitsvarianten wie schwerer kombinierter Immundefizienz (SCID) assoziiert, was seine Bedeutung für die Immunentwicklung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde unter Verwendung eines rekombinanten Immunogens erzeugt, das die Aminosäuren 504-685 der humanen LIG4 umfasst, eine Region innerhalb der katalytischen Kerndomäne. Für den Western Blot sollten reduzierende Bedingungen und eine positive Kontrolle wie HeLa- oder Jurkat-Zelllysate in Betracht gezogen werden; das erwartete Molekulargewicht beträgt etwa 104 kDa.
• Bei ELISA-Anwendungen sollte die Antikörperspezifität mit rekombinantem LIG4-Protein oder Peptidbeschichtung validiert und die Nachweisbedingungen für humane Proben optimiert werden.
• Angesichts des Kaninchen-Ursprungs sollte ein geeigneter sekundärer Anti-Kaninchen-Antikörper, konjugiert mit HRP oder anderen Nachweisenzymen, verwendet werden.
• Für humane Proben wird Kreuzreaktivität angegeben; bei Anwendung auf andere Spezies sollten Sequenzalignment und Pilotversuche durchgeführt werden.
• Der Antikörper wird auf Eisbeuteln verpackt und versandt; zur Aufrechterhaltung der Stabilität gemäß Empfehlung lagern.

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