Anti-DNA-Ligase III/LIG3 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P49916

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von DNA-Ligase III/LIG3

• DNA-Ligase 3 (LIG3) kodiert für mehrere Isoformen: Isoform 3 bildet im Zellkern ein Heterodimer mit XRCC1, um defekte DNA-Strangbruchreparatur und Schwesterchromatidaustausch nach ionisierender Strahlung und Alkylierungsmitteln zu korrigieren, während Isoform 1 zu den Mitochondrien transportiert wird und an der mitochondrialen Basenexzisions-DNA-Reparatur beteiligt ist. Zugehörige Referenzen: PMID:10207110 PMID:24674627
• Das Protein enthält essentielle Zinkfinger-Motive und gehört zur Familie der ATP-abhängigen DNA-Ligasen, wobei es eine Schlüsselrolle bei DNA-Rekombination, Replikation und Reparatur spielt.
• LIG3 ist sowohl im Zellkern als auch in den Mitochondrien lokalisiert, was seine Doppelfunktion bei der Erhaltung der genomischen und mitochondrialen Integrität bestätigt.
• Es handelt sich um ein Phosphoprotein mit regulatorischen Funktionen während des Zellzyklus, insbesondere bei der Zellteilung und DNA-Replikation.
• Eine hohe Expression wird in Hoden, Thymus, Prostata und Herz beobachtet, was auf gewebespezifische Anforderungen an die DNA-Reparatur hinweist.
• Mutationen in LIG3 sind mit der mitochondrialen DNA-Depletionssyndrom 20 (MTDPS20) verbunden, einer primären mitochondrialen Erkrankung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen (Aa 400–500) liegt in einer konservierten Region; basierend auf der Sequenzhomologie ist eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte zu erwarten, dennoch wird eine Validierung im relevanten Probensystem empfohlen.
• Für das Western Blotting ist eine Bande bei ~113 kDa zu erwarten; für die effiziente Blotierung von hochmolekularen Proteinen sollte die Verwendung eines Gels mit niedrigem Prozentsatz und verlängerte Transferzeiten in Betracht gezogen werden.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigen-Retrieval mit hitzeinduzierter Epitop-Retrieval (z. B. Citratpuffer pH 6,0 oder EDTA-Puffer pH 9,0) und validieren Sie mit geeigneten Gewebekontrollen.
• ELISA-Protokolle können direkte oder indirekte Detektion verwenden; die Paarung mit einem validierten Detektionsantikörper, der gegen ein anderes Epitop gerichtet ist, kann die Assay-Empfindlichkeit verbessern.

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