Anti-DLDH/DLD Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09622

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DLDH/DLD-Funktion und Lokalisierung

• DLDH/DLD (Dihydrolipoyl-Dehydrogenase) ist ein Flavoprotein-Oxidoreduktase, das FAD und NAD als Cofaktoren verwendet und als Homodimer vorliegt. Es wird durch das DLD-Gen kodiert, wobei alternatives Spleißen mehrere Isoformen erzeugt.
• Als E3-Komponente der Pyruvat-, α-Ketoglutarat- und verzweigtkettigen α-Ketosäure-Dehydrogenase-Komplexe katalysiert DLDH die Reoxidation von Dihydrolipoamid mit NAD+ als Elektronenakzeptor, was für den mitochondrialen Energiestoffwechsel essentiell ist. Verwandte Referenzen: PMID:16442803, PMID:16770810, PMID:20160912
• Es ist auch eine Komponente des Glycin-Spaltungssystems (GCS), beteiligt am Glycinabbau und Ein-Kohlenstoff-Stoffwechsel, mit der Bezeichnung GCSL. Verwandte Referenzen: PMID:15712224
• Im Zellkern assoziiert DLDH mit der Histon-Succinyltransferase KAT2A, liefert Succinyl-CoA für die Histon-Lysin-Succinylierung und verbindet so den Stoffwechsel mit der epigenetischen Regulation. Verwandte Referenzen: PMID:29211711
• Monomeres DLDH könnte als "Moonlighting"-Serinprotease fungieren, wie durch eine Spaltungsaktivität nahegelegt wird, die unabhängig von seiner Dehydrogenase-Rolle ist. Verwandte Referenzen: PMID:17404228
• Subzelluläre Fraktionierung und Immunlokalisierung zeigen DLDH in der mitochondrialen Matrix, im Zellkern sowie in Zellfortsätzen (Zilien, Flagellen) und zytoplasmatischen Vesikeln (Akrosom), was auf Rollen bei der Spermienkapazitation und Akrosomreaktion hindeutet (durch Ähnlichkeit).
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Disulfidbindungsbildung, die seine Aktivität und Lokalisierung regulieren können; Mutationen in DLD verursachen Dihydrolipoamid-Dehydrogenase-Mangel (E3-Mangel).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 401–500 von humanem DLDH/DLD, einer Region, die wahrscheinlich unter Säugetieren konserviert ist, was mit der beobachteten Kreuzreaktivität zu Maus und Ratte übereinstimmt.
• Für Western Blotting (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~54 kDa (Vorläufer); die Verwendung reduzierender Bedingungen hilft, Disulfidbindungen aufzubrechen. Fügen Sie geeignete zelluläre Fraktionierungskontrollen hinzu, wenn die mitochondriale versus nukleäre Lokalisierung bewertet wird.
• Bei der Immunhistochemie (IHC‑P) und Immunzytochemie (IF/ICC) validieren Sie den Antikörper in Gewebe-/Zelltypen, von denen bekannt ist, dass sie DLDH exprimieren, und berücksichtigen Sie Antigen-Retrieval-Methoden, da die Färbung variieren kann.
• Für ELISA-Anwendungen bestätigen Sie die Bindung an rekombinantes oder natives DLDH-Protein unter Ihren Assay-Bedingungen.

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