Anti-DLC1 polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q96QB1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DLC1-Funktion und Lokalisierung

• DLC1 ist ein Rho GTPase-aktivierendes Protein (RhoGAP), das spezifisch die kleinen GTPasen RHOA, RHOB, RHOC und CDC42 inaktiviert und damit deren nachgeschaltete Signalwege beendet.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der Zytoskelett-Reorganisation, Zellmigration und Proliferation und wird in mehreren Krebsarten als Tumorsuppressor anerkannt.
• Zusätzlich zu seiner RhoGAP-Aktivität fungiert DLC1 als Aktivator der Phospholipase PLCD1.
• Während wachstumsfaktorinduzierter epithelialer Zellmigration bildet DLC1 Komplexe mit TNS3 und PTEN; nach Stimulation löst Phosphorylierung einen Wechsel aus, bei dem PTEN an DLC1 bindet und TNS3 an p85 bindet, was zur RHOA-Aktivierung an der Zellrückseite und RAC1-Aktivierung an der Führungsfront führt. Verwandte Referenzen: PMID:26166433
• DLC1 lokalisiert im Zytoplasma, an fokalen Adhäsionen und der Zellmembran, was mit seinen Rollen bei Zelladhäsion und Migration übereinstimmt.
• Das Protein wird am stärksten in der Milz exprimiert, mit geringeren Mengen in Prostata, Hoden, Eierstöcken, Dünndarm und Kolon; es fehlt im Thymus.
• DLC1 enthält eine START-Domäne (StAR-verwandte Lipidtransfer), was sich in seinem alternativen Namen STARD12 widerspiegelt, die Lipid- oder Sterol-Interaktionen vermitteln könnte.
• Das Gen unterliegt alternativem Spleißen und nutzt alternative Promotoren, wodurch mehrere Transkriptvarianten entstehen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 204–463, eine Region stromaufwärts der charakteristischen RhoGAP-Domäne; dieses Design kann Spezifität für DLC1-Isoformen ohne Beeinträchtigung des GAP-Aktivitätsnachweises bieten.
• Für Western Blot detektiert dieser Antikörper ein Band um das vorhergesagte Molekulargewicht von 171 kDa; ziehen Sie positive Kontrollen aus humanen, murinen oder ratten Zelllysaten, von denen bekannt ist, dass sie DLC1 exprimieren (z. B. milzabgeleitete Zelllinien), angesichts der berichteten Kreuzreaktivität in Betracht.
• Für ELISA-Anwendungen optimieren Sie die Antigenbeschichtungsbedingungen mit rekombinantem Vollängen-DLC1 oder dem Immunogenfragment und verifizieren Sie die Linearität der Detektion mit seriellen Verdünnungen eines Standardproteins.
• Da DLC1 in fokaler Adhäsion und Migration funktioniert, sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für die Immunzytochemie sorgfältig optimiert werden, um die native Lokalisierung zu bewahren; beachten Sie, dass dieser Antikörper in den Produktspezifikationen nicht für ICC/IHC validiert ist.

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