Anti-DLAT Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10515

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DLAT-Funktion und -Lokalisierung

• DLAT kodiert die Dihydrolipoamid-Acetyltransferase-Komponente (E2) des mitochondrialen Pyruvat-Dehydrogenase (PDH)-Komplexes, der die Umwandlung von Pyruvat zu Acetyl-CoA katalysiert und damit die Glykolyse mit dem TCA-Zyklus verbindet (Wahrscheinlich).
• Der PDH-Komplex enthält mehrere Kopien von drei Enzymen: E1 (Pyruvat-Dehydrogenase), E2 (Dihydrolipoamid-Acetyltransferase) und E3 (Dihydrolipoamid-Dehydrogenase). DLAT bildet den E2-Kern, nimmt Acetylgruppen von der Lipoyl-Gruppe von E1 auf und überträgt sie auf Coenzym A, um Acetyl-CoA zu bilden (Wahrscheinlich).
• Bekannte Aliase für DLAT sind PDC-E2, PDCE2, DLTA, E2 und PBC; Letzteres spiegelt seine Identifizierung als Hauptautoantigen bei der primär biliären Cholangitis (M2-Antigenkomplex 70 kDa Untereinheit) wider.
• Subzellulär lokalisiert sich DLAT in der mitochondrialen Matrix, wie durch seine Annotation zur SUBCELLULAR LOCATION und das Vorhandensein eines mitochondrialen Transitpeptids angezeigt wird.
• Posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung, Lipoylierung und Phosphorylierung sind in den UniProt-Schlüsselwörtern vermerkt und verdeutlichen die komplexe Regulation des PDH-Komplexes.
• Die Identifizierung durch Proteomik und der Status des Referenzproteoms bestätigen die robuste Detektion von DLAT in proteomischen Studien, was seiner Rolle als wichtiges Stoffwechselenzym entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 87-270 ab, was die Lipoyl-Bindungsdomäne einschließt; daher wird erwartet, dass dieser Antikörper sowohl natives als auch rekombinantes DLAT nachweist. Für WB beträgt die erwartete Bandengröße ca. 69 kDa; die Verwendung von mitochondrienangereicherten Proben kann die Signalspezifität verbessern.
• Bei IF/ICC ist eine mitochondriale Färbung zu erwarten; eine Kollokalisierung mit Organellmarkern (z. B. MitoTracker) wird zur Validierung empfohlen.
• Der Antikörper ist mit Maus und Ratte kreuzreaktiv; überprüfen Sie die Sequenzhomologie im Immunogenbereich, wenn eine spezies-spezifische Detektion entscheidend ist.
• Für IHC-P sollten Sie eine Antigen-Retrieval und eine Optimierung der Verdünnung in Betracht ziehen. Verwenden Sie Positivkontrollgewebe mit hohen DLAT-Spiegeln (z. B. Leber, Herz), um die Reaktivität zu bestätigen.
• Für ELISA stellen Sie sicher, dass das rekombinante Protein oder Peptidantigen mit der Immunogensequenz übereinstimmt, um eine Epitop-Maskierung zu vermeiden.

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