Anti-DKC1 polyklonaler Antikörper für IHC-P, IF/ICC, ELISA – O60832

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von DKC1

• DKC1 kodiert Dyskerin, die katalytische Untereinheit des H/ACA-small-nucleolar-Ribonukleoprotein-(snoRNP-)Komplexes, der für die Pseudouridylierung von rRNA verantwortlich ist. Es isomerisiert Uridin, sodass sich die Ribose an C5 statt an N1 bindet, wodurch Pseudouridinreste eingeführt werden, die die rRNA-Konformation stabilisieren. Verwandte Referenzen: PMID:25219674 PMID:32554502
• DKC1 ist für die Ribosomenbiogenese essenziell und wird durch die korrekte Prozessierung und den intranukleären Transport von TERC (der RNA-Komponente der Telomerase) für die Telomererhaltung benötigt. Verwandte Referenz: PMID:19179534
• Es fördert außerdem die Zell-Zell- und Zell-Substrat-Adhäsion, erhöht die Zellproliferationsrate und induziert eine Überexpression von Zytokeratin.
• Es befindet sich überwiegend im Nukleolus und in den Cajal-Körperchen innerhalb des Zellkerns, ist jedoch auch teilweise im Zytoplasma vorhanden.
• Es wird ubiquitär in menschlichen Geweben exprimiert, was seine Funktion als Haushaltsprotein bei der rRNA-Modifikation widerspiegelt.
• Es unterliegt verschiedenen posttranslationalen Modifikationen, darunter Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitin-ähnliche Konjugation, die seine Aktivität oder Stabilität regulieren können.
• Genetische Varianten in DKC1 stehen mit X-chromosomaler Dyskeratosis congenita in Verbindung, die durch Knochenmarkversagen, eine Prädisposition für Krebserkrankungen sowie Merkmale wie Nageldystrophie und orale Leukoplakie gekennzeichnet ist; Mutationen können auch das Hoyeraal-Hreidarsson-Syndrom verursachen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 245–514 des humanen DKC1 (NP_001354.1) und deckt den zentralen bis C-terminalen Bereich ab. Berücksichtigen Sie diese Sequenz bei der Entwicklung komplementärer Nachweisreagenzien oder beim Epitop-Mapping.
• Da DKC1 bei IHC-P ubiquitär exprimiert wird, jedoch in Nukleolen angereichert ist, sollten Sie die Antigenrückgewinnung optimieren und die Färbung in positivem Kontrollgewebe wie Hoden oder proliferierenden Zelllinien validieren. Fügen Sie Negativkontrollen (z. B. DKC1-depletierte Proben) ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• IF/ICC-Anwendungen sollten die Lokalisation im Nukleolus und in den Cajal-Körperchen sichtbar machen. Verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsverfahren und führen Sie eine Doppelfärbung mit einem Nukleolusmarker (z. B. Fibrillarin) durch, um das erwartete Muster zu überprüfen.
• Für ELISA kann aufgrund der relativ großen Proteingröße eine sorgfältige Optimierung der Beschichtungsbedingungen und des Nachweises erforderlich sein. Die Kreuzreaktivität mit Orthologen von Maus und Ratte sollte experimentell überprüft werden, wenn Proben dieser Spezies verwendet werden.

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