Anti-DIAPH1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - O60610

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DIAPH1-Funktion und Lokalisierung

• DIAPH1, auch bekannt als Protein Diaphanous Homolog 1 oder Diaphanous-verwandtes Formin-1 (DRF1), wird vom DIAPH1-Gen beim Menschen kodiert. Es gehört zur Formin-Familie der Aktin-Nukleationsfaktoren.
• Fungiert als Aktin-Nukleations- und Elongationsfaktor, der für den Aufbau von F-Aktin-Strukturen, einschließlich Aktin-Kabeln und Stressfasern, essentiell ist. Bindet an die barbed ends von Aktinfilamenten und moduliert die Polymerisationsdynamik. Verwandte Referenzen: PMID:20937854 PMID:21834987
• Wirkt als Gerüstprotein, das das Aktin- und Mikrotubuli-Zytoskelett verbindet, indem es mit MAPRE1 und APC interagiert, um Mikrotubuli zu stabilisieren und die Zellmigration zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:20937854 PMID:21834987
• Spielt eine kritische Rolle in Rho- und Src-abhängigen Signalwegen, koppelt extrazelluläre Signale an das Zytoskelett-Remodeling und wird für die Zytokinese, die Serum-Response-Faktor (SRF)-transkriptionelle Aktivierung und die Zellformkontrolle benötigt.
• Lokalisiert in mehreren subzellulären Kompartimenten, einschließlich Zellmembran, Membranausstülpungen (Ruffles), Zentrosom, Spindel, Zytoplasma und Zellkern, was seine vielfältigen Rollen bei der Organisation des Zytoskeletts widerspiegelt.
• Hoch exprimiert in Gehirn, Herz, Plazenta, Lunge, Niere, Bauchspeicheldrüse, Leber, Skelettmuskel und Cochlea, mit bemerkenswerter Anwesenheit in Blutplättchen, was mit seiner Beteiligung an Zellmotilität und Hören übereinstimmt. Verwandte Referenzen: PMID:26912466
• In Haarzellen reguliert DIAPH1 die Aktinpolymerisation, die für die auditorische Funktion entscheidend ist; Defekte führen zum DFNA1 nicht-syndromalen sensorineuralen Hörverlust. Verwandte Referenzen: PMID:20937854 PMID:21834987 PMID:26912466
• Zusätzlich fördert DIAPH1 die nukleare Aktinpolymerisation und treibt die serumabhängige SRF-MRTFA-Transkriptionsaktivität an (By similarity).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1-100 von humanem DIAPH1 umspannt; diese N-terminale Region könnte ein konserviertes Epitop targetieren, was wahrscheinlich zur beobachteten Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte beiträgt.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 141 kDa. Ziehen Sie die Verwendung eines Gels mit niedrigem Prozentgehalt und angemessene Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine in Betracht.
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; die optimalen Arbeitskonzentrationen sollten jedoch empirisch bestimmt werden.
• Angesichts der weitverbreiteten Expression sollte die Detektionsspezifität in relevanten Zelllinien (z.B. HeLa, HEK293, NIH/3T3) oder Gewebelysaten validiert werden, wobei geeignete positive und negative Kontrollen sicherzustellen sind.
• Für Zytoskelettstudien erwägen Sie, diesen Antikörper mit Phalloidin-Färbung zu kombinieren, um die DIAPH1-Lokalisierung mit F-Aktin-Strukturen zu korrelieren.

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