Anti-DHX9/RNA-Helikase A Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q08211

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DHX9/RNA-Helikase A Funktion und Lokalisierung

• DHX9, auch bekannt als RNA-Helikase A, DEAH-Box-Protein 9, Leukophysin (LKP) und nukleäre DNA-Helikase II (NDH II), ist eine multifunktionelle DEAH-Box-RNA-Helikase.
• Besitzt ATP-abhängige 3'→5'-Helikaseaktivität, die eine breite Palette von Substraten entwindet, einschließlich dsDNA, dsRNA, DNA:RNA-Hybride, Gabeln, D-Schleifen, R-Schleifen, Tripel-DNA und G-Quadruplexe; erfordert einen 3' einzelsträngigen Überhang für den Eintritt. Bindet ssDNA, ssRNA, poly(A)-RNA und zirkuläre Substrate; stimuliert die TOP2A-vermittelte Supercoil-Relaxation. Verwandte Referenzen: PMID:1537828 PMID:20669935 PMID:21561811 PMID:24049074 PMID:12711669
• Wirkt als transkriptioneller Koaktivator, der RNA-Polymerase II mit Transkriptionsfaktoren (BRCA1, CREBBP, RELA, SMN1) verbrückt und an den CDKN2A-Promotor bindet. Verwandte Referenzen: PMID:11038348 PMID:11149922 PMID:11416126
• Spielt diverse Rollen in der post-transkriptionellen Genregulation: kooperiert mit NUP98 beim alternativen Spleißen, löst schädliche invertierte Alu-Wiederholungs-dsRNA-Strukturen auf und erleichtert den nukleären Export von CTE-haltigen ungespleißten mRNAs. Verwandte Referenzen: PMID:11402034 PMID:16680162 PMID:28221134 PMID:28355180 PMID:10924507 PMID:9162007
• Beteiligt an der mRNA-Translation: verbessert die Translation über PCE im 5'-UTR, stabilisiert MYC-mRNA durch den CRD-vermittelten Komplex und stimuliert die Kollagen- und LIN28A-abhängige Translation zusammen mit LARP6 und LIN28A. Verwandte Referenzen: PMID:16680162 PMID:19029303 PMID:22190748 PMID:21247876
• Fungiert als siRNA-Ladefaktor für die RISC-Assembly und RNA-vermittelte Gen-Silencing. Verwandte Referenzen: PMID:17531811
• In der angeborenen Immunität bindet es kurze Rotavirus-abgeleitete dsRNA und löst die Aktivierung des NLRP9-Inflammasoms aus, was zur Freisetzung von IL-18 und Pyroptose führt. Verwandte Referenzen: PMID:28636595
• Überwiegend nukleär (Nukleoplasma, Nukleolus), lokalisiert aber auch im Zytoplasma, Zentrosom und Zytoskelett; unterliegt umfangreichen post-translationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 329–563 von DHX9, einem Bereich, der bei Mensch, Maus und Ratte konserviert ist; diese Sequenz liegt innerhalb der Helikase-Kerndomäne und wird voraussichtlich mehrere Isoformen nachweisen.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~141 kDa. Stellen Sie einen ausreichenden Proteintransfer sicher und verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker. Optimieren Sie Blockierung und Antikörperverdünnung für Ihren Probentyp.
• Für die Immunfluoreszenz/Immunzytochemie ist DHX9 sowohl in nukleären als auch zytoplasmatischen Kompartimenten verteilt. Validieren Sie Fixierungs-/Permeabilisierungsbedingungen, um die Antigenzugänglichkeit zu erhalten, und erwägen Sie die Verwendung von Co-Färbungen für zelluläre Strukturen.
• Für die Immunpräzipitation verwenden Sie optimierte Lysepuffer, die Protease- und Phosphataseinhibitoren enthalten, um Proteininteraktionen aufrechtzuerhalten. Eine Negativkontrolle (z. B. Kaninchen-IgG) ist unerlässlich.
• Die ELISA-Leistung sollte mit gereinigtem Antigen oder Zelllysaten kalibriert werden, und die Kreuzreaktivität mit verwandten DEAH-Box-Helikasen kann je nach experimentellen Spezifitätsanforderungen bewertet werden.

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