Anti-DGCR8 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q8WYQ5

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DGCR8-Funktion und Lokalisierung

• Kodiert durch das DGCR8-Gen (C22orf12, DGCRK6) auf Chromosom 22, ist DGCR8 die RNA-bindende Untereinheit des Mikroprozessor-Komplexes, der für die primäre miRNA-Verarbeitung essentiell ist.
• DGCR8 fungiert als molekularer Anker, der die dsRNA-ssRNA-Verbindung von pri-miRNAs erkennt und DROSHA anweist, präzise 11 bp entfernt zu schneiden, wodurch pre-miRNA-Haarnadelschleifen entstehen.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:15531877 PMID:15574589 PMID:15589161 PMID:26027739 PMID:26748718
• Die Bindung von Häm an DGCR8 fördert die Dimerisierung und die Bildung eines kooperativen Trimers, das die pri-miRNA-Spaltaktivität erhöht, während das hämfreie Monomer eine geringere Aktivität aufweist.
• DGCR8 erkennt spezifisch N6-Methyladenosin (m6A)-Modifikationen in pri-miRNAs, ein entscheidender Faktor für eine effiziente Verarbeitung.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:25799998
• Zusätzlich zur miRNA-Biogenese ist DGCR8 an der Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen beteiligt, indem es die Rekrutierung von RNF168 an DNA-Schadensfoci erleichtert.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:34188037
• DGCR8 ist hauptsächlich im Zellkern und Nukleolus lokalisiert, was mit seinen Rollen in der RNA-Verarbeitung und Genomstabilität übereinstimmt.
• Das Protein ist allgegenwärtig exprimiert und posttranslationalen Modifikationen wie Phosphorylierung, Isopeptidbindungsbildung und Ubiquitin-ähnlicher Konjugation unterworfen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Bei der Durchführung von Western Blot ist eine Bande bei etwa 86 kDa zu erwarten; validieren Sie die Spezifität mittels siRNA-vermittelter Knockdown- oder DGCR8-überexprimierender Lysate.
• Für ELISA kann das Immunogen (Aminosäuren 436-764) als positive Kontrolle dienen; erwägen Sie, die Beschichtungs- und Nachweisbedingungen in der relevanten Probenmatrix zu optimieren.
• Überprüfen Sie die Kreuzreaktivität in menschlichen und murinen Systemen wie angegeben; für andere Spezies aufgrund der Sequenzerhaltung empirisch testen.
• Da DGCR8 an dynamischen Proteinkomplexen beteiligt ist, können native oder mild denaturierende Bedingungen erforderlich sein, um die Epitopzugänglichkeit in immunpräzipitationsbasierten Anwendungen zu erhalten.
• Der Antikörper könnte nach Validierung auch für Immunhistochemie oder Immunfluoreszenz geeignet sein; erwägen Sie Antigen-Retrieval-Methoden, die für Kernproteine geeignet sind.

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