Anti-DENND4A polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q7Z401

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DENND4A-Funktion und -Lokalisierung

• DENND4A, auch bekannt als C-myc-Promoter-bindendes Protein (MYCPBP) und IRLB, ist ein DENN-Domänen-enthaltendes Protein, das als Guanin-Nukleotid-Austauschfaktor (GEF) und Transkriptionsregulator fungiert.
• Es kann RAB10 aktivieren, indem es den Austausch von GDP gegen GTP fördert und so inaktive GDP-gebundene Rab-Proteine in ihren aktiven GTP-gebundenen Zustand überführt.
• Es bindet an das ISRE-ähnliche Element (Interferon-stimuliertes Response-Element) des MYC-P2-Promotors und reguliert möglicherweise die MYC-Expression. Verwandte Referenzen: PMID:8056341
• Die subzelluläre Lokalisierung erfolgt hauptsächlich im Zellkern, was zu seiner Rolle in der Transkriptionsregulation passt.
• Ubiquitär exprimiert, mit höchsten Werten im Knochenmark, mittleren in peripheren Blutlymphozyten und niedrigsten in der Milz. In Gehirn-, Brust- und Prostatagewebe ist die Expression in normalen Zellen höher als in Tumorzellen.
• Die Expression wird wachstums- und zellzyklusabhängig reguliert, was auf eine Beteiligung an der Proliferationskontrolle hindeutet.
• Das Protein unterliegt alternatives Spleißen und Phosphorylierung, was zusätzliche Ebenen der funktionellen Regulation hinzufügt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von DENND4A etwa 209 kDa. Erwägen Sie die Verwendung eines SDS-PAGE-Gels mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6-8%) und ausreichender Transferzeit, um einen effizienten Transfer hochmolekularer Proteine sicherzustellen.
• Als polyklonaler Antikörper sollte die Chargen-zu-Charge-Konsistenz validiert werden. Schließen Sie geeignete positive und negative Kontrollen in Ihre Experimente ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1500-1650 von humanem DENND4A (NP_005839.3). Für Experimente mit Mausproben überprüfen Sie die Sequenzhomologie in der Zielregion.
• Für ELISA-Anwendungen sollten optimale Beschichtungskonzentrationen und Nachweisbedingungen empirisch bestimmt werden.
• Angesichts der nukleären Lokalisierung von DENND4A sollten Sie die Verwendung von kernangereicherten Lysaten für eine verbesserte Detektion im WB in Betracht ziehen.

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