Anti-DDX5 (p68) Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P17844

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von DDX5

• DDX5, auch bekannt als p68, gehört zur Familie der DEAD-Box-Proteine und fungiert als wahrscheinliche ATP-abhängige RNA-Helikase.
• Es spielt eine Rolle bei der alternativen Prä-mRNA-Spleißung, zum Beispiel bei der Erhöhung der Inklusion von Tau-Exon 10 in einer RBM4-abhängigen Weise, und seine Helikaseaktivität wird durch einzelsträngige RNA stimuliert.
• DDX5 agiert als transkriptioneller Koregulator: Es koaktiviert den Androgenrezeptor (AR), MYOD1 (beteiligt an der Skelettmuskeldifferenzierung), TP53 (als Antwort auf DNA-Schäden) und RUNX2 (Osteoblastendifferenzierung) und kann die Transkription auch durch Assoziation mit Histondeacetylasen reprimieren.
• Als Teil eines großen PER-Komplexes ist DDX5 an der Regulation des circadianen Rhythmus beteiligt, indem es die 3'-transkriptionelle Termination von Uhrgenen wie PER1 und NR1D1 hemmt.
• Das Protein lokalisiert überwiegend im Zellkern, einschließlich Nukleolen und nuklearen Speckeln, kann aber auch im Zytoplasma gefunden werden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung, Isopeptidbindung (Ubl-Konjugation) und weitere Modifikationen, die seine Aktivität regulieren können.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die volle Länge der humanen DDX5-Sequenz (Aminosäuren 1-614) abdeckt. Dieses Design kann eine breite Epitoperkennung ermöglichen, jedoch sollte die Kreuzreaktivität mit anderen Mitgliedern der DEAD-Box-Familie berücksichtigt und im entsprechenden Probenystem validiert werden.
• Für das Western Blotting beträgt das erwartete Molekulargewicht von DDX5 ungefähr 69 kDa; in positiven Proben sollte eine Bande dieser Größe beobachtet werden. Die endogenen Spiegel können zwischen Zelllinien und Geweben variieren.
• Bei der Immunhistochemie (paraffineingebettete Schnitte) sollten Antigen-Retrieval-Bedingungen und Antikörperverdünnung für spezifische Gewebetypen optimiert werden, da die Lokalisation überwiegend nuklear, aber auch zytoplasmatisch sein kann.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA kann die Paarung mit einem anderen Anti-DDX5-Antikörper erforderlich sein.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist nachgewiesen, wodurch der Antikörper für Studien an Nagetiermodellen geeignet ist. Dennoch werden Sequenzabgleich und Vorversuche zur Bestätigung der Reaktivität empfohlen.

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