Anti-DDX4 (VASA) Kaninchenmonoklonaler Antikörper für WB – Q9NQI0

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von DDX4

• DDX4 (DEAD-box-Protein 4), auch bekannt als VASA, gehört zur Familie der DEAD-box-RNA-Helikasen, die durch das konservierte Asp-Glu-Ala-Asp (DEAD)-Motiv gekennzeichnet sind. Es fungiert als ATP-abhängige RNA-Helikase, die für die Keimzellentwicklung unentbehrlich ist (PubMed:10920202, PubMed:21034600). Verwandte Referenzen: PMID:10920202, PMID:21034600
• Bei der Spermatogenese ist DDX4 erforderlich, um transponierbare Elemente über den piRNA-Signalweg zu reprimieren und die genomische Integrität in der Keimbahn zu erhalten (nach Ähnlichkeit). Dies umfasst die Bildung von piRNA-Piwei-Proteinkomplexen und die Vermittlung der Transposon-Methylierung.
• DDX4 beteiligt sich an der Biosynthese sekundärer piRNAs über einen Ping-Pong-Amplifikationszyklus in fötalen männlichen Keimzellen, und seine Helikaseaktivität ermöglicht die Verarbeitung von Prä-piRNAs zu reifen piRNAs (nach Ähnlichkeit).
• Das Protein enthält mehrere Domänen: einen zentralen Helikasekern mit ATP-bindender und Hydrolyseaktivität sowie möglicherweise Wiederholungssequenzen. Es findet alternatives Spleißen statt, das verschiedene Isoformen erzeugt.
• DDX4 ist überwiegend im Zytoplasma lokalisiert, mit Anreicherung in der perinukleären Region (nach Ähnlichkeit).
• Die Gewebeexpression ist auf Ovar und Hoden beschränkt, mit Expression in wandernden primordialen Keimzellen in der Gonadenleiste (nach Ähnlichkeit).
• Schlüsselwörter sind Entwicklungsprotein, Differenzierung, Meiose, Spermatogenese und RNA-vermittelte Gen-Stummschaltung, was seine entscheidenden Rollen in der Keimzellbiologie widerspiegelt.
• Es gibt Hinweise auf Phosphorylierung als posttranslationale Modifikation (aus dem UniProt-Schlüsselwort Phosphoprotein).

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 635–724 nahe dem C-Terminus von menschlichem DDX4 (NP_077726.1). Diese Region ist wahrscheinlich spezifisch für menschliches DDX4, aber die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde bestätigt. Bei der Beurteilung der Spezifität sollten Sie Sequenzalignment über Spezies hinweg berücksichtigen.
• Dieser kaninchenmonoklonale Antikörper ist für mehrere Anwendungen geeignet: Western Blot (WB) zum Nachweis einer Bande bei ~79 kDa, Immunpräzipitation (IP), Immunfluoreszenz an paraffineingebetteten Geweben (IF-P), Immunhistochemie an Paraffinschnitten (IHC-P) und ELISA. Wie bei jedem Antikörper wird die Optimierung von Verdünnung und Versuchsbedingungen empfohlen.
• Für Studien zu keimzellspezifischer Expression kann der Antikörper mit Lysaten oder Schnitten von Eierstock- oder Hodengewebe getestet werden. Aufgrund der eingeschränkten Expression sollten passende Negativkontrollen mitgeführt werden.

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