Anti-DDX11 polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, ELISA - Q96FC9

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der ATP-abhängigen DNA-Helikase DDX11

• DDX11 ist eine ATP-abhängige DNA-Helikase, die DNA in 5'- zu 3'-Richtung entwindet und für das Laden und die Translokation ein minimales 5'-einzelsträngiges Ende (15 nt für Flaps, 10 nt für Lücken-Substrate) benötigt. Sie kann Duplex-Regionen von bis zu 100 bp verdrängen, was durch RPA oder Ctf18-RFC auf 500 bp erweitert werden kann. Zugehörige Referenzen: PMID:10648783, PMID:21854770, PMID:23797032, PMID:18499658, PMID:22102414
• Sie ist an der Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen an Replikationsgabeln beteiligt, stimuliert die FEN1-Flap-Endonuklease-Aktivität zur Prozessierung von Okazaki-Fragmenten und assoziiert mit Chromatin in replizierenden Regionen. Zugehörige Referenzen: PMID:23797032, PMID:18499658, PMID:27477908
• DDX11 kooperiert mit TIMELESS, um den Fortschritt der Replikationsgabel unter Stress zu bewahren und die Schwesterchromatiden-Kohäsion sowie die mitotische Chromosomensegregation zu regulieren. Zugehörige Referenzen: PMID:26503245, PMID:17105772, PMID:18499658, PMID:20124417
• Ihre Funktion an Replikationsgabeln wird durch die lncRNA DDX11-AS1/CONCR moduliert, welche die ATPase-Aktivität und die DNA-Bindung verstärkt. Zugehörige Referenzen: PMID:27477908
• DDX11 trägt zur Heterochromatin-Organisation bei und aktiviert die rRNA-Transkription durch Rekrutierung von UBTF und RNA-Polymerase I an hypomethylierte rDNA-Loci. Zugehörige Referenzen: PMID:21854770, PMID:26089203
• Das Protein lokalisiert im Zellkern, Nukleolus, an den Spindelpolen und am Midbody. Es wird stark in Milz, Thymus, Hoden und Melanomzellen exprimiert, jedoch nicht in normalen Melanozyten, und unterstützt die Proliferation von Melanomzellen. Zugehörige Referenzen: PMID:23116066, PMID:9013641
• DDX11 ist ein Phosphoprotein, das Eisen-Schwefel-Cluster (4Fe-4S) koordiniert und ATP- sowie Nukleinsäure-Bindungsmotive enthält.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western-Blot-Nachweis von endogenem DDX11 (~108 kDa) sollten Ganzzell-Lysate aus hoch-exprimierenden Zelllinien (z. B. Melanomlinien) verwendet und eine ausreichende Gelelektrophorese-Trennung für große Proteine sichergestellt werden.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität durch Einbeziehung geeigneter Positiv- und Negativkontrollen, da polyklonale Antikörper chargenabhängige Variationen aufweisen können.
• Im ELISA kann das rekombinante Immunogen (N-terminale 1–220 Aminosäuren) als Positivkontrolle oder Beschichtungsantigen dienen; titrieren Sie die Antikörperkonzentrationen für optimale Signal-Rausch-Verhältnisse.
• Angesichts der Reaktivität des Antikörpers mit humanem DDX11 sollte eine Kreuzreaktivität mit Orthologen oder Isoformen experimentell bestätigt werden, falls er in anderen Spezies verwendet wird.

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