Anti-DDIT3/CHOP Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA - P35638

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DDIT3/CHOP-Funktion und Lokalisierung

• DDIT3 (DNA-schadensinduzierbares Transkript 3), auch als CHOP (C/EBP-homologes Protein), CHOP-10 und GADD153 bezeichnet, ist ein Mitglied der C/EBP-Familie von Transkriptionsfaktoren, das als dominant-negativer Inhibitor der C/EBP-vermittelten Transkription wirkt.
• Es fungiert als zentraler Mediator der endoplasmatischen Retikulum (ER)-Stressantwort und löst unter verschiedenen Stressbedingungen Zellzyklusarrest und Apoptose aus. Verwandte Referenzen: PMID:15322075 PMID:15775988 PMID:19672300
• DDIT3 heterodimerisiert mit anderen C/EBP-Proteinen, beeinträchtigt deren DNA-Bindungsfähigkeit und unterdrückt die Expression von Zielgenen.
• Als transkriptioneller Regulator induziert es pro-apoptotische Gene wie TRIB3, BBC3/PUMA und BCL2L11/BIM, während es die Expression von anti-apoptotischem BCL2 und MYOD1 unterdrückt. Verwandte Referenzen: PMID:15775988 PMID:17709599 PMID:20876114 PMID:18940792 PMID:19672300 PMID:20829347
• DDIT3 reguliert den kanonischen Wnt-Signalweg negativ, indem es an TCF7L2/TCF4 bindet und dessen transkriptionelle Aktivität blockiert. Verwandte Referenzen: PMID:16434966
• Das Protein pendelt dynamisch zwischen Zytoplasma und Zellkern und reichert sich bei ER-Stress im Zellkern an, um Genexpressionsprogramme zu orchestrieren.
• DDIT3 unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitin-ähnlicher Konjugation, die seine Aktivität und seinen Umsatz modulieren können.
• Über die Apoptose hinaus ist DDIT3 an Entzündungsreaktionen beteiligt, indem es die Caspase-11 (CASP4)-abhängige IL-1β-Reifung fördert, und trägt über die NOS3-Regulation zur postnatalen Vaskularisierung bei.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–100) von humanem DDIT3, einer relativ konservierten Domäne; die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde experimentell bestätigt, für andere Spezies sollte jedoch eine Sequenzalignment-Überprüfung erfolgen.
• Für Western Blot (WB): Erwartet wird ein Band bei etwa 19 kDa; beachten Sie, dass posttranslationale Modifikationen oder stressinduzierte Isoformen zusätzliche Bänder erzeugen können. Optimieren Sie die Blockierung und Antikörperverdünnung, um den Hintergrund zu minimieren, da polyklonale Präparationen unspezifische Bindung zeigen können.
• Für Immunhistochemie (IHC-P): Eine Antigen-Demaskierung wird empfohlen; validieren Sie die Färbung in ER-gestressten oder apoptotischen Gewebeschnitten, in denen DDIT3 hochreguliert ist.
• Für Immunpräzipitation (IP): Der Antikörper bindet an ein lineares Peptid-Epitop und sollte natives DDIT3 effektiv einfangen; schließen Sie geeignete positive und negative Kontrollen ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA: Geeignet zur Quantifizierung von DDIT3 in Zelllysaten oder Serumproben; verwenden Sie bei der Entwicklung eines Sandwich-Assays einen passenden Detektionsantikörper.
• Als polyklonaler Antikörper kann die Charge-zu-Charge-Konsistenz variieren; ziehen Sie in Betracht, eine Referenzcharge für Langzeitstudien zurückzulegen.

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