Anti-DDB2 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q92466

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DDB2-Funktion und -Lokalisierung

• DDB2 (DNA damage-binding protein 2) ist die Substraterkennungs-Untereinheit des UV-DDB-Komplexes, der UV-induzierte DNA-Läsionen erkennt, einschließlich Cyclobutan-Pyrimidin-Dimeren (CPD), 6-4-Photoprodukten (6-4 PP), apurinischen Stellen und kurzen Fehlpaarungen. Verwandte Referenzen: PMID:10882109, PMID:11278856, PMID:11705987

• Als Teil des DCX (DDB1-CUL4-X-box) E3-Ubiquitin-Ligase-Komplexes DDB2-CUL4-ROC1 lenkt DDB2 die Ubiquitinierung der Histone H2A, H3 und H4 an Schadensstellen, was möglicherweise deren Entfernung aus Nukleosomen erleichtert, um die Reparatur zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:12732143, PMID:16473935, PMID:16678110

• Die DDB2-haltige E3-Ligase ubiquitiniert auch das XPC-Protein, um die DNA-Bindung und NER zu verbessern, und zielt auf KAT7/HBO1 für den Abbau nach ATR-vermittelter Phosphorylierung in der DNA-Schadensantwort ab. Verwandte Referenzen: PMID:15882621, PMID:26572825

• DDB2 lokalisiert überwiegend im Zellkern und ist mit Chromatin assoziiert, was seine direkte Beteiligung an der genomischen Überwachung und DNA-Reparaturprozessen widerspiegelt.

• Ubiquitär exprimiert, zeigt DDB2 die höchsten Spiegel im Hornhautendothel, wobei mehrere alternativ gespleißte Isoforme gewebsspezifische Verteilungsmuster aufweisen.

• DDB2 wird unter Schlüsselwörtern wie DNA-Reparatur, DNA-Schaden und Ubl-Konjugierungsweg klassifiziert; Mutationen in DDB2 sind mit der zur Hautkrebsneigung führenden Störung Xeroderma pigmentosum (XP) Gruppe E verknüpft.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen erstreckt sich über die N-terminale Region (aa 1-315) und kann mehrere DDB2-Isoforme erkennen; überprüfen Sie die Isoformspezifität durch Vergleich der Bandgrössen im Western Blot.
• Für WB wird eine einzelne Bande von ~48 kDa erwartet; fügen Sie UV-behandelte positive Kontrollen hinzu, um schadensabhängige posttranslationale Modifikationen zu überwachen.
• In IF/ICC-Anwendungen sollte eine Kernfärbung erkennbar sein; eine Kolokalisierung mit DNA-Schadensmarkern (z. B. γH2AX) kann die Rekrutierung an Läsionsstellen bestätigen.
• Für ELISA verwenden Sie das rekombinante Immunogen als Standard und bewerten die Kreuzreaktivität mit Lysaten von Maus und Ratte, angesichts der bestätigten artübergreifenden Kreuzreaktivität.
• Aufgrund der Beteiligung von DDB2 an Ubiquitinierungswegen sollten Sie die Verwendung von Proteasom-Inhibitoren oder Deubiquitinase-Inhibitoren in Betracht ziehen, um ubiquitinierte Formen in bestimmten experimentellen Aufbauten zu stabilisieren.

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