Anti-DDAH1 polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IF/ICC und ELISA - O94760

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: DDAH1-Funktion und Lokalisation

• DDAH1 (Dimethylarginin-Dimethylaminohydrolase 1) ist ein Hydrolase-Enzym, das spezifisch N(G),N(G)-Dimethyl-L-arginin (ADMA) und N(G)-Monomethyl-L-arginin (MMA), endogene Inhibitoren der Stickoxid-Synthase (NOS), hydrolysiert. Diese Aktivität spielt eine entscheidende Rolle bei der Regulierung der Stickoxid (NO)-Bildung.
• Das DDAH1-Gen unterliegt alternativem Spleißen, wodurch mehrere Isoformen entstehen, die gewebespezifische Expression oder unterschiedliche regulatorische Eigenschaften aufweisen können.
• DDAH1 ist ein metallbindendes Protein, das Zinkionen koordiniert, die für seine katalytische Aktivität und strukturelle Integrität wesentlich sind.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen von DDAH1 gehören Acetylierung und S-Nitrosylierung, die seine enzymatische Funktion und subzelluläre Lokalisation als Reaktion auf zelluläre Signale modulieren können.
• DDAH1 wird in nachweisbaren Mengen in Gehirn, Leber, Niere und Bauchspeicheldrüse exprimiert, mit geringerer Expression in der Skelettmuskulatur, was auf gewebespezifische Rollen bei NO-vermittelten Prozessen hindeutet.
• Schlüsselwörter aus UniProt: 3D-Struktur, Acetylierung, Alternatives Spleißen, Direkte Proteinsequenzierung, Hydrolase, Metallbindung, Proteomik-Identifizierung, Referenz-Proteom, S-Nitrosylierung, Zink.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 1-285 des menschlichen DDAH1 umfasst, was einer großen N-terminalen Region entspricht. Dieses Design führt in der Regel zu Antikörpern mit guter Spezifität für das Zielprotein.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 31 kDa. Überprüfen Sie die Bandengröße in positiven Kontrolllysaten (z. B. aus menschlichem Gehirn, Leber oder Niere) und ziehen Sie die Verwendung geeigneter Ladekontrollen in Betracht.
• Für Immunfluoreszenz/Immuncytochemie optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um eine spezifische Färbung zu erreichen, und validieren Sie diese mit Negativkontrollen.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-DDAH1 wurde beobachtet; aufgrund von Sequenzunterschieden wird jedoch empfohlen, die Leistung unter Verwendung von Lysaten oder Gewebeschnitten der entsprechenden Spezies zu bestätigen.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise eine Optimierung der Beschichtungspuffer und Detektionssysteme; überprüfen Sie den linearen Bereich unter Verwendung von rekombinantem DDAH1-Protein als Standard.

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