Anti-DBH-Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF, IHC-P, ELISA - P09172

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Dopamin-Beta-Hydroxylase

• Dopamin-Beta-Hydroxylase (DBH), auch bekannt als Dopamin-Beta-Monooxygenase, ist eine kupferhaltige Monooxygenase, die die Hydroxylierung von Dopamin zu Noradrenalin katalysiert, ein kritischer Schritt in der Biosynthese von Katecholamin-Neurotransmittern.
• Das Enzym ist im Lumen sekretorischer Vesikel lokalisiert, einschließlich Chromaffingranula des Nebennierenmarks und großer dichte-Kern-Vesikel sympathischer Neuronen, und kann auch in den extrazellulären Raum sezerniert werden.
• DBH liegt als tetrameres Glykoprotein mit intermolekularen Disulfidbrücken vor, was zu seiner strukturellen Stabilität und enzymatischen Funktion beiträgt.
• Für die volle katalytische Aktivität benötigt es Kupferionen und Ascorbat (Vitamin C) als Cofaktoren, was seine Funktion mit dem zellulären Redox- und Metallhomöostase verbindet.
• Mutationen im DBH-Gen sind mit einem Dopamin-Beta-Hydroxylase-Mangel assoziiert, einer seltenen autosomal-rezessiven Störung, die durch orthostatische Hypotonie, Ptosis und Noradrenalinmangel gekennzeichnet ist.
• Das Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 69 kDa, mit umfangreichen posttranslationalen Modifikationen einschließlich N-verknüpfter Glykosylierung.
• DBH ist über ein Signalanker-Transmembransegment an sekretorische Vesikelmembranen verankert, wobei der Großteil des Proteins, einschließlich der katalytischen Domäne, zum Vesikellumen zeigt.
• Schlüsselwörter von UniProt umfassen 3D-Struktur, Katecholamin-Biosynthese, Kupfer, Krankheitsvariante, Glykoprotein und sezerniert, was seine vielseitigen Rollen in der Neurobiologie und menschlichen Krankheiten unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 388-617 von humanem DBH, einer Region, die voraussichtlich Teil der katalytischen Domäne ist; daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich die reife, aktive Form des Proteins.
• Für Western Blotting (WB) sollte die Probenvorbereitung unter reduzierenden und denaturierenden Bedingungen optimiert werden; ein Band bei etwa 69 kDa in Zelllysaten oder Nebennierengewebeextrakten ist zu erwarten.
• Dieser Antikörper ist für mehrere Anwendungen geeignet, einschließlich Immunpräzipitation (IP), Immunfluoreszenz (IF/ICC und IF-P) und Immunhistochemie (IHC-P); Antikörperverdünnungen sollten empirisch im relevanten Probensystem validiert werden.
• Angesichts der Kreuzreaktivität mit Maus-DBH kann der Antikörper in transgenen oder Knock-out-Mausmodellen eingesetzt werden, um die Spezifität zu bestätigen; verwenden Sie geeignete positive und negative Kontrollgewebe.
• Für ELISA sollte die Beschichtung mit rekombinantem DBH-Protein oder ein Sandwich-Format mit einem gepaarten Capture/Detektions-Antikörper in Betracht gezogen werden, um die Empfindlichkeit und den dynamischen Bereich zu verbessern.

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