Anti-DARS2-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q6PI48

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DARS2-Funktion und -Lokalisierung

• DARS2 kodiert die mitochondriale Aspartyl-tRNA-Synthetase (AspRS), ein Mitglied der Familie der Aminoacyl-tRNA-Synthetasen der Klasse II, das für die mitochondriale Proteinsynthese entscheidend ist.
• Katalysiert die zweistufige Bindung von Aspartat an tRNA(Asp): Zuerst wird Aspartat mit ATP aktiviert, um Asp-AMP zu bilden, anschließend wird Aspartat auf die Akzeptorstelle der tRNA übertragen.
• Lokalisiert hauptsächlich in der mitochondrialen Matrix und kann mit der mitochondrialen Membran assoziiert sein, was seine Rolle bei der mitochondrialen Translation widerspiegelt.
• Alternativnamen sind LBSL, ASPRS, mtAspRS und MT-ASPRS; das Protein ist das mitochondriale Gegenstück zum zytoplasmatischen DARS.
• Mutationen in DARS2 verursachen Leukenzephalopathie mit Beteiligung von Hirnstamm und Rückenmark sowie Laktaterhöhung (LBSL), was es mit Neurodegeneration und der Charcot-Marie-Tooth-Krankheit verbindet.
• Posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung wurden identifiziert, die möglicherweise die Enzymaktivität oder -stabilität regulieren.
• Das Protein ist auch mit 3D-Struktur, ATP-Bindung und Isopeptidbindung annotiert, was seinen konservierten katalytischen Mechanismus hervorhebt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt den C-terminalen Bereich (aa 406–645) ab, der einen Teil der katalytischen Domäne umfasst; bestätigen Sie das detektierte Band bei ~74 kDa in Ihrem Probentyp und berücksichtigen Sie die Möglichkeit von alternatives Spleißen oder Prozessierung.
• Für Western Blot optimieren Sie die Antikörperverdünnung (z. B. 1:500–1:2000) und verwenden Sie mitochondrial angereicherte Lysate, um das Signal zu verstärken, angesichts der mitochondrialen Lokalisierung.
• Bei IHC-P testen Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen (z. B. Citratpuffer pH 6,0) und fügen Sie eine Kontrolle ohne Primärantikörper hinzu, um die Spezifität zu bewerten.
• Für ELISA kombinieren Sie es mit einem geeigneten enzymkonjugierten Sekundärantikörper und validieren die Linearität unter Verwendung von rekombinantem DARS2-Protein als Standard.

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