Anti-DAPP1 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9UN19

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: DAPP1-Funktion und Lokalisierung

• DAPP1 (auch bekannt als BAM32) ist ein B-Lymphozyten-Adapterprotein von etwa 32 kDa.
• Es fungiert als dualer Adapter für Phosphotyrosin und 3-Phosphoinositide und verknüpft die B-Zell-Antigen-Rezeptor (BCR)-Signalübertragung mit nachgeschalteten Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K)-Signalwegen.
• Das Protein enthält eine SH2-Domäne und eine Pleckstrin-Homologie (PH)-Domäne, die eine Membranrekrutierung und Proteininteraktion ermöglichen.
• DAPP1 ist vorwiegend im Zytoplasma lokalisiert und kann bei Aktivierung mit der Plasmamembran assoziieren.
• Die Gewebeexpression ist in Plazenta und Lunge am höchsten, mit geringeren Werten in Gehirn, Herz, Niere, Leber, Bauchspeicheldrüse und Skelettmuskulatur.
• Es wird spezifisch in B-Lymphozyten exprimiert und ist in T-Lymphozyten oder nicht-hämatopoetischen Zellen nicht nachweisbar.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, was mit seiner Rolle bei der Signalübertragung übereinstimmt.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Transkriptvarianten, was seine funktionelle Vielfalt potenziell moduliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 100–273, eine zentrale Region von DAPP1; dieses Design kann den Nachweis von DAPP1 in voller Länge verbessern, erfordert jedoch eine Validierung der Isoform-Spezifität.
• Für Western Blotting: DAPP1 ist ein zytoplasmatisches und membranassoziiertes Protein; verwenden Sie geeignete Lysepuffer und ziehen Sie eine Zentrifugation bei niedriger Geschwindigkeit in Betracht, um die Membranfraktionen zu erhalten.
• Bei der Immunfluoreszenz kann die Membranlokalisierung reizabhängig sein; Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen sollten optimiert werden, um sowohl zytoplasmatische als auch Membran-Pools sichtbar zu machen.
• Für ELISA kann das Peptid-Immunogen als Positivkontrolle dienen; eine Titration und Prüfung der Kreuzreaktivität gegen ähnliche Proteine mit SH2/PH-Domäne wird jedoch empfohlen.
• Die DAPP1-Expression ist B-Zell-spezifisch; validieren Sie die Antikörperleistung in B-Lymphozyten-Linien (z. B. Ramos, Raji) anstelle von T-Zell-Linien, um die Spezifität zu bestätigen.

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