Kaninchen-polyklonaler Anti-DAPK3-Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O43293

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von DAPK3

• DAPK3 (Death-associated protein kinase 3), auch als ZIPK oder Dlk bekannt, ist eine Serin/Threonin-Kinase, die eine zentrale Rolle bei der Regulation von Apoptose, Autophagie, Transkription, Translation und der Dynamik des Aktin-Zytoskeletts spielt.
• Durch die Phosphorylierung der leichten Myosinketten (MYL12B, MYL9) und der Zieluntereinheit der Myosinphosphatase (PPP1R12A) moduliert DAPK3 die Kontraktion der glatten Muskulatur und die Organisation von Aktin-Stressfasern in nicht-muskulären Zellen.
• Die Kinase ist sowohl an Kaspase-abhängigen (Typ I) als auch an Kaspase-unabhängigen (Typ II) Zelltodwegen beteiligt. Ihre Überexpression kann abhängig vom zellulären Kontext Apoptose oder autophagischen Zelltod auslösen.
• DAPK3 ist in verschiedenen subzellulären Kompartimenten lokalisiert, darunter im Zellkern, in PML-Körperchen, Zentrosomen, Zentromeren, der Spindel, dem Mittelstück und dem Aktin-Zytoskelett, was seine vielfältigen funktionellen Aufgaben widerspiegelt.
• Es reguliert den kanonischen Wnt/β-Catenin-Signalweg positiv durch Interaktion mit NLK und TCF7L2 und verstärkt die durch den Androgenrezeptor vermittelte Transkription, wodurch es mit Entwicklungs- und Hormonwegen verknüpft ist.
• Unter Stimulation mit Interferon-gamma phosphoryliert DAPK3 das ribosomale Protein RPL13A, wodurch dessen Freisetzung aus den Ribosomen und seine Beteiligung am GAIT-Komplex gefördert werden, um die Translation bestimmter Transkripte zu hemmen.
• Das Protein wird in verschiedenen Geweben weit verbreitet exprimiert, wobei Isoform 1 und Isoform 2 besonders in der glatten Blasenmuskulatur vorkommen, und wird als potenzieller Tumorsuppressor eingestuft.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-100) des humanen DAPK3; daher wird erwartet, dass der Antikörper Epitope innerhalb dieser Domäne erkennt.
• Im Western Blot sollte eine Bande bei ungefähr 53 kDa beobachtet werden, was dem vorhergesagten Molekulargewicht von DAPK3 entspricht. Überprüfen Sie den Nachweis in Lysaten geeigneter Zelllinien oder Gewebe, die das Zielprotein exprimieren.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunzytochemie (IF/ICC) können Fixierung und Antigen-Retrieval-Bedingungen die Färbung beeinflussen. Titrien Sie den Antikörper und verwenden Sie geeignete Kontrollen (z. B. Knockdown- oder Knockout-Proben), um die Spezifität zu bestätigen.
• Es wurde berichtet, dass der Antikörper mit DAPK3 aus Maus und Ratte kreuzreagiert, wahrscheinlich aufgrund der Sequenzkonservierung in der Immunogenregion. Dennoch sollten Anwender die Reaktivität in ihren spezifischen experimentellen Systemen validieren.
• Als polyklonaler Antikörper kann es zu Schwankungen zwischen verschiedenen Chargen kommen. Es wird empfohlen, jede neue Charge zu titrieren und bei Verdacht auf unspezifische Bindung den Einsatz von Blockierungspeptiden für Kompetitionsassays in Betracht zu ziehen.

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