Monoklonaler Anti-DAP-Kinase 1 (DAPK1)-Antikörper für WB und ELISA – P53355

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von DAP-Kinase 1 (DAPK1)

• Das Gen kodiert für eine Kalzium/Calmodulin-abhängige Serin/Threonin-Kinase, die je nach zellulärem Kontext Signale für Apoptose, Autophagie und Zellüberleben integriert.
• Vermittelt sowohl Kaspase-abhängigen Typ I-Apoptosetod als auch Kaspase-unabhängigen Typ II-Autophagietod, der durch die Akkumulation autophager Vesikel charakterisiert ist.
• Reguliert diverse Substrate wie PIN1, TPM1, STX1A, PRKD1, BECN1, TSC2, RPS6, MYL9, DAPK3 und GRINB und beeinflusst dadurch Zytoskelettdynamik, Exozytose, Stresssignalisierung, Autophagieinduktion, mTORC1-Aktivität und NMDA-Rezeptor-vermittelte Exzitotoxizität.
• Isoform 2 weist keine apoptotische Aktivität auf, behält aber die Fähigkeit zur Induktion von Membranblasen bei; sie wird in normalem Darmgewebe und kolorektalen Karzinomen exprimiert.
• Lokalisiert im Zytoplasma und assoziiert mit dem Zytoskelett.
• Besitzt charakteristische Domänen: N-terminale Kinasedomäne, Calmodulin-bindende Region, Ankyrin-Wiederholungen und eine C-terminale Todesdomäne; verfügt zusätzlich über ATP- und GTP-bindende Motive.
• Ist unter Schlüsselwörtern wie alternatives Spleißen, Apoptose, Autophagie, Phosphoprotein und Ubl-Konjugation aufgeführt, was seine komplexe Regulation und funktionelle Vielseitigkeit widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen liegt innerhalb der Reste 250–350, einer Region zwischen der Kinasedomäne und dem Calmodulin-bindenden Motiv; berücksichtigen Sie die Überprüfung der Epitopzugänglichkeit unter nativen versus denaturierenden Bedingungen.
• Für Western Blot stellt die primäre Bande bei ~160 kDa die Volllängen-DAPK1 dar; zusätzliche Banden können durch Spleiß-Isoformen oder Abbauprodukte entstehen – eine Validierung mit geeigneten Kontrollen (z. B. Knockdown- oder Knockout-Lysate) wird empfohlen.
• Bestätigen Sie die Kreuzreaktivität in Mausproben, da der Antikörper bekanntermaßen sowohl humane als auch murine DAPK1 erkennt.
• Für ELISA können Standardprotokolle für indirekte oder Sandwich-ELISA angewendet werden; optimieren Sie die Beschichtungskonzentration und Detektionsbedingungen für Ihr spezifisches Assayformat.
• Beachten Sie, dass Isoform 2 die Peptidsequenz möglicherweise nicht enthält; überprüfen Sie die Expressionsprofile in Ihrer Probenmenge (z. B. normales vs. krebsartiges Darmgewebe), um Fehlinterpretationen zu vermeiden.

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