Anti-DAG1-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q14118

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: DAG1-Funktion und -Lokalisierung

• Dystroglykan 1 (DAG1) ist eine zentrale Komponente des Dystrophin-Glykoprotein-Komplexes, der die extrazelluläre Matrix mit dem intrazellulären Zytoskelett verbindet. Es wird als Vorläuferprotein exprimiert, das eine autokatalytische Spaltung in peripheres Alpha-Dystroglykan und transmembranäres Beta-Dystroglykan durchläuft.
• Der Dystroglykan-Komplex beteiligt sich an der Laminin-Ablagerung und der Zusammenstellung der extrazellulären Matrix, der Clusterbildung von Acetylcholinrezeptoren an der neuromuskulären Endplatte, der Sarkolemm-Stabilität, dem Zellüberleben, der Myelinisierung peripherer Nerven, der Zellmigration, der epithelialen Polarisation und der epithelialen Verzweigungsmorphogenese.
• Alpha-Dystroglykan bindet an extrazelluläre Matrixproteine, die Laminin-G-Domänen enthalten (z. B. Laminin-1/-2, Agrin, Perlecan) und vermittelt die Signalübertragung über PI3K/AKT- und Src-Kinase-Weg, wodurch Apoptosesignale und die synaptische Organisation reguliert werden.
• Beta-Dystroglykan verankert an Dystrophin (DMD) oder Utrophin (UTRN) und gerüstet Axin an das Aktin-Zytoskelett, was die durch Zelladhäsion vermittelte Signalübertragung und die Zellpolarität erleichtert.
• In Knorpel bindet DAG1 an Agrin und reguliert den chondrogenen Transkptionsfaktor SOX9 hoch, was die Knorpelbildung positiv reguliert.
  Verwandte Referenzen: PMID:26290588
• Das Protein lokalisiert sich in mehrere Kompartimente: das Sarkolemm und die postsynaptische Membran, synaptische Stellen, die Basalmembran, den extrazellulären Raum, das Zytoplasma/Zytoskelett und den Nukleoplasma.
• DAG1 fungiert als Wirtszellrezeptor für Klasse-C-New-World-Arenaviren (Lassa, lymphozytäre Choriomeningitis-Virus) und für den Eintritt von Mycobacterium leprae in Schwann-Zellen.
  Verwandte Referenzen: PMID:16254364, PMID:17360738, PMID:19324387, PMID:9851927
• Wird in einer Vielzahl fetaler und adulter Gewebe exprimiert, mit prominenter Lokalisierung zur Basalmembran in der Epidermis und Expression in Keratinozyten und Fibroblasten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 654–749) befindet sich im C-terminalen Teil von Beta-Dystroglykan; es wird erwartet, dass der Antikörper sowohl das全长 ~97 kDa Vorläuferprotein als auch die gespaltene Beta-Untereinheit (~43 kDa) in denaturierenden/reduzierenden Western Blots erkennt.
• Für Western Blots validieren Sie das beobachtete Bandmuster in bekannten positiven Geweben/Zelllinien (z. B. Skelettmuskel, Gehirn) und erwägen Sie die Verwendung von frischen, proteasegehemmten Lysaten, um einen Abbau zu verhindern.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC ist eine Permeabilisierung erforderlich, um Zugang zum intrazellulären Epitop zu erhalten. Eine Co-Färbung mit sarkolemmalen oder Basalmembranmarkern kann die Lokalisierung bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz unter Verwendung von rekombinanten DAG1-Fragmenten oder Zelllysaten unter Standardbedingungen; die Leistung sollte im Assay-System des Endanwenders optimiert werden.
• Eine Spezies-Kreuzreaktivität wurde für Mensch, Maus und Ratte berichtet; wenn Sie mit anderen Spezies arbeiten, testen Sie dies experimentell und bestätigen Sie vorher die Sequenzhomologie.

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