Anti-D2HGDH polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q8N465

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: D2HGDH-Funktion und Lokalisierung

• D2HGDH (D-2-Hydroxyglutarat-Dehydrogenase) ist ein mitochondriales Enzym, das die Oxidation von D-2-Hydroxyglutarat zu α-Ketoglutarat katalysiert, einen kritischen Schritt im Stoffwechsel von D-2-Hydroxysäuren. Verwandte Referenzen: PMID:15070399 PMID:15609246 PMID:16037974
• Das Enzym akzeptiert auch D-Malat und D-Laktat als Substrate, zeigt eine hohe Aktivität gegenüber D-Malat, aber nur eine sehr schwache Aktivität gegenüber D-Laktat. Verwandte Referenzen: PMID:33431826
• D2HGDH ist ein Flavoprotein, das FAD und Zinkionen als Cofaktoren für seine katalytische Aktivität benötigt.
• Es ist in der mitochondrialen Matrix lokalisiert, wobei ein N-terminales Transitpeptid seinen Import in das Organell steuert.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Transkriptvarianten, und das Protein ist in Proteomik-Referenzdatenbanken leicht zu identifizieren.
• Mutationen im D2HGDH-Gen sind mit der D-2-Hydroxyglutarsäure-Azidurie assoziiert, einer schweren neurometabolischen Störung, was seine klinische Bedeutung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem C-terminalen Fragment (Aminosäuren 322–521), daher erkennt dieser polyklonale Antikörper wahrscheinlich sowohl natives als auch denaturiertes D2HGDH.
• Für Western Blot: 20–30 µg reduzierend-denaturiertes Lysat aus humanen, Maus- oder Rattenproben auftragen und nach einem Band bei etwa 56 kDa suchen. Die Primärantikörper-Verdünnung empirisch optimieren.
• In ELISA kann der Antikörper entweder als Capture- oder als Detektionsreagenz verwendet werden. Führen Sie Schachbrett-Titrationen mit Ihrem Antigen durch, um optimale Arbeitskonzentrationen zu bestimmen.
• Da bei polyklonalen Antikörpern Chargen-zu-Chargen-Schwankungen auftreten können, sollten Sie in jedem Experiment geeignete positive und negative Kontrollen einschließen.

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