Anti-Cytokeratin-9-(KRT9)-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - P35527

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Cytokeratin 9 (KRT9)

• Cytokeratin 9 (KRT9), auch bekannt als Keratin-9 (K9) oder CK-9, ist ein Typ-I-Zytoskelettkeratin, das beim Menschen vom KRT9-Gen kodiert wird.
• Es dient als struktureller Bestandteil intermediärer Filamente, insbesondere in suprabasalen Keratinozyten der palmoplantaren Epidermis, und lagert sich mit Typ-II-Keratinen zusammen, um robuste Keratinnetzwerke zu bilden.
• Diese intermediären Keratinfilamentnetzwerke sind entscheidend für die Aufrechterhaltung der mechanischen Integrität und Widerstandsfähigkeit der Haut von Handflächen und Fußsohlen, die erheblichem Druck und Reibung ausgesetzt ist.
• Die Expression von KRT9 ist streng auf die terminal differenzierte Epidermis von Handflächen und Fußsohlen begrenzt, was seine spezialisierte Rolle an diesen stark belasteten Körperstellen unterstreicht.
• Mutationen in KRT9 stehen mit der epidermolytischen palmoplantaren Keratodermie (EPPK) in Zusammenhang, einer autosomal-dominant vererbten Hauterkrankung, die durch eine diffuse Verdickung der Haut von Handflächen und Fußsohlen gekennzeichnet ist.
• Die Proteinstruktur weist eine zentrale stabförmige Coiled-Coil-Domäne auf, die für Proteine intermediärer Filamente typisch ist und die Dimerisierung sowie den Filamentaufbau ermöglicht.
• Die posttranslationale Regulation kann Phosphorylierungsereignisse umfassen, wie durch proteomische Studien angezeigt wird.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 150–450 des humanen KRT9 und liegt somit in einer internen Region. Dieses Design kann den Nachweis des Gesamtproteins KRT9 in verschiedenen Probentypen ermöglichen.
• Für den Western Blot (WB) sollten denaturierende und reduzierende Bedingungen verwendet werden. Es sollte außerdem die Verwendung einer Ladekontrolle wie GAPDH oder β-Aktin in Betracht gezogen werden. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 62 kDa; die Identität der Bande sollte mithilfe geeigneter positiver (z. B. Lysat von Handflächenhaut) und negativer Kontrollen validiert werden.
• Für die Immunfluoreszenz (IF-P) sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsverfahren optimiert werden. Da KRT9 ein zytoplasmatisches intermediäres Filament ist, ist eine Permeabilisierung unerlässlich. Zur Darstellung der Zelllokalisation sollte eine nukleäre Gegenfärbung wie DAPI eingesetzt werden.
• Für ELISA-Anwendungen sollte der Antikörper mithilfe von rekombinantem KRT9 oder Zelllysaten titriert werden, um optimale Arbeitsverdünnungen zu bestimmen. Die Kombination mit einem abgestimmten Detektionsantikörper kann die Sensitivität verbessern.
• Eine Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte wurde berichtet. Die Spezifität sollte jedoch in der jeweiligen Spezies und im entsprechenden Gewebekontext überprüft werden, da die Expression auf die Epidermis von Handflächen und Fußsohlen begrenzt ist.

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